[发明专利]一种马鹿胰岛素样生长因子制备方法在审
| 申请号： | 201610325337.9 | 申请日： | 2016-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN105821069A | 公开（公告）日： | 2016-08-03 |
| 发明（设计）人： | 宋平;王瑜;陈建兵 | 申请（专利权）人： | 上海蓝庄生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K14/65;C07K1/34 |
| 代理公司： | 上海兆丰知识产权代理事务所(有限合伙) 31241 | 代理人： | 屠轶凡 |
| 地址： | 201799 上海市青浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种马鹿胰岛素样生长因子制备方法，包括下列步骤：1)用deer‑IGF‑Ⅰ基因片段和PET44质粒构建重组质粒；2)对所述重组质粒进行扩增，并从中筛选出单克隆阳性的重组质粒；3)将单克隆阳性的重组质粒转化入BL21(DEa)大肠杆菌中得到重组子，在培养基中通过所述重组子进行deer‑IGF‑Ⅰ蛋白诱导表达；4)将所述重组子的菌体从所述培养基中分离，并在破菌液中，对所述重组子的菌体进行破菌，使deer‑IGF‑Ⅰ蛋白以可溶性融合蛋白的表达形式进入所述破菌液；5)对所述可溶性融合蛋白进行酶切，使所述可溶性融合蛋白分解为deer‑IGF‑Ⅰ蛋白和Nus蛋白；6)对deer‑IGF‑Ⅰ蛋白进行纯化、透析除盐和浓缩。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 马鹿 胰岛素 生长因子 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种马鹿胰岛素样生长因子制备方法，包括下列步骤：1)用deer‑IGF‑I基因片段和PET44质粒构建重组质粒；2)对所述重组质粒进行扩增，并从中筛选出单克隆阳性的重组质粒；3)将单克隆阳性的重组质粒转化入BL21(DEa)大肠杆菌中得到重组子，在培养基中通过所述重组子进行deer‑IGF‑I蛋白诱导表达；4)将所述重组子的菌体从所述培养基中分离，并在破菌液中，对所述重组子的菌体进行破菌，使deer‑IGF‑I蛋白以可溶性融合蛋白的表达形式进入所述破菌液；5)对所述可溶性融合蛋白进行酶切，使所述可溶性融合蛋白分解为deer‑IGF‑I蛋白和Nus蛋白；6)对deer‑IGF‑I蛋白进行纯化、透析除盐和浓缩，得到deer‑IGF‑I蛋白。
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