[发明专利]鹅OAZ1多肽抗原及其多克隆抗体制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201610325381.X 申请日: 2016-05-17
公开(公告)号: CN106008690B 公开(公告)日: 2019-06-14
发明(设计)人: 康波;姜冬梅;徐麒麟;马容;何珲;陈咨余;易治鑫;龙诗韵 申请(专利权)人: 四川农业大学
主分类号: C07K14/465 分类号: C07K14/465;C07K16/18;C07K16/06;G01N33/68
代理公司: 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 代理人: 汤东凤
地址: 611130 四*** 国省代码: 四川;51
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摘要: 一种鹅OAZ1多肽抗原及其多克隆抗体的制备方法和应用,本发明在鹅OAZ1序列基础上,鉴定了鹅OAZ1基因的+1移码位点,并在+1移码位点后筛选、鉴定了一段特异性多肽序列。发明方法包括:①OAZ1序列分析及多肽抗原序列的筛选和鉴定。②OAZ1多肽抗原序列N端修饰、合成及检测。③将OAZ1多肽抗原免疫新西兰兔制备抗血清并检测其效价;④OAZ1抗体的纯化。本发明所制备的OAZ1多肽抗体可特异性结合鹅组织中OAZ1全长功能蛋白质,填补了鹅OAZ1蛋白质检测研究领域的空白,为鹅OAZ1功能以及多胺调控动物繁殖功能的研究奠定基础。
搜索关键词: oaz1 多肽 抗原 及其 克隆 抗体 制备 方法 应用
【主权项】:
1.一种抗鹅OAZ1多肽抗体的制备方法,其特征在于,OAZ1多肽抗原的氨基酸位点位于其+1移码位点之后,其序列如SEQ ID NO.1所示,合成SEQ ID NO.1所示多肽序列,在其N端增加一个半胱氨酸得到N端修饰肽,序列如SEQ ID NO.2所示,并进行质谱和高效液相色谱检测,将N端修饰肽与血蓝蛋白交联得到交联多肽,用该交联多肽免疫新西兰兔后,颈总动脉放血收集新西兰兔血液,3000rpm离心10min后收集血清,然后应用亲和柱层析的方法纯化血清中的OAZ1多克隆抗体。
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