[发明专利]一种一步法检测降钙素原的试剂盒及其制备方法

摘要

本发明提供一种一步法检测人血清中降钙素原含量的试剂盒及其制备方法。本检测试剂盒采用一步夹心法反应原理，所述试剂盒包括：校准品、酶结合物、包被板、发光底物液、浓缩洗涤液，其中，所述酶结合物为辣根过氧化物酶标记的抗PCT单克隆抗体，所述包被板为将抗PCT单克隆抗体包被在固相载体表面。本发明提供一种方便快速、灵敏度高、特异性强、重复性好、定量准确范围广且能在90分钟内得到检测结果且成本低等优点。本发明提供的PCT检测试剂盒，它仪器兼容性强，检测成本低，弥补了临床上对PCT检测产品的需求。

主权项

1.一种一步法检测降钙素原（PCT）的试剂盒，本检测试剂盒采用一步夹心法反应原理，并结合化学发光免疫技术，所述试剂盒包括：校准品、酶结合物、包被板、发光底物液、浓缩洗涤液，其中，所述酶结合物为辣根过氧化物酶标记的抗PCT单克隆抗体，所述包被板为将抗PCT单克隆抗体包被在固相载体表面，其特征在于，所述包被板的制备方法为：选用0.01～0.05M pH为7.0～9.6的磷酸盐作包被缓冲液，将抗PCT单克隆抗体按2～10μg/ml稀释，加入微孔板中，100μl～200μl/孔，2～8℃过夜包被后甩去包被液，加入通用BSA封闭液100μl～200μl/孔，2～8℃过夜以封闭板孔壁上的空白位点，然后甩去封闭液，扣干、室温吹干，所述校准品是采用组分为0.01～0.05M pH 7.0～9.6的磷酸盐缓冲液，体积比为2～20％新生牛血清和0.1％～1％proclin‑300的校准品稀释液将PCT抗原稀释至0.2～50ng/ml制备得到，所述酶结合物是采用配方为0.01～0.05M pH7.0～9.6的磷酸盐缓冲液，体积比为2～20％新生牛血清，0.1％～1％Proclin‑300和0.1％～0.5％食品红的酶稀释液将酶‑抗体结合物按照1∶1000～1∶10000的体积比稀释制备得到，所述发光底物液组分为2～10mmol/L过氧化氢，2～10mmol/L 鲁米诺，2～10mmol/L对碘苯酚，10～100mmol/L pH 7.0～9.6的Tris‑HCL缓冲液，所述浓缩洗涤液为包括0.01～0.05M pH为7.0～9.6的磷酸盐缓冲液，质量比为10～20％的NaCl并含0.2～2％Tween 20的缓冲液。