[发明专利]一种新型高活力蒜氨酸酶及其制备方法有效
申请号: | 201610330256.8 | 申请日: | 2016-05-18 |
公开(公告)号: | CN105838729B | 公开(公告)日: | 2019-07-09 |
发明(设计)人: | 路福平;刘逸寒;郭伟;韩杨;贾雷博 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C12N15/60 | 分类号: | C12N15/60;C12N15/10;C12N9/88;C12N15/75;C12N15/81 |
代理公司: | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人: | 赵瑶瑶 |
地址: | 300222 天津市河*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种新型高活力蒜氨酸酶及其制备方法,其技术方案是利用随机突变技术改造来源于大蒜鳞茎的野生型蒜氨酸酶基因,得到高活力的蒜氨酸酶突变体基因,即新型高活力蒜氨酸酶基因,然后将新型高活力蒜氨酸酶基因分别在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达,得到产高活力蒜氨酸酶的重组菌株,发酵表达后,检测高活力蒜氨酸酶的比酶活较野生型蒜氨酸酶提高50%。 | ||
搜索关键词: | 一种 新型 活力 氨酸 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种新型高活力蒜氨酸酶突变体的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:⑴通过易错PCR随机突变大蒜鳞茎的野生型蒜氨酸酶基因,第674位碱基A→T,第799位碱基G→T,第800位碱基A→T,第801位碱基A→C,得到新型高活力蒜氨酸酶突变体编码基因;⑵将所述的新型高活力蒜氨酸酶突变体编码基因酶切、连接到表达或展示载体,得到携带高活力蒜氨酸酶突变体编码基因重组载体;⑶将重组载体转化至宿主细胞,得到重组菌株;⑷表达所述的重组菌株,纯化获得如SEQ ID NO:6所示的新型高活力蒜氨酸酶。
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