[发明专利]一种检测待测药物对目的细胞的细胞毒性的方法及其专用细胞芯片

摘要

本发明公开了一种检测待测药物对目的细胞的细胞毒性的方法及其专用细胞芯片。本发明所提供的细胞芯片，包括支持介质和附着于所述支持介质上方的琼脂糖凝胶膜；所述琼脂糖凝胶膜上分布有若干个微阱，每个微阱的大小与单个目的细胞的大小相匹配；每个微阱内附着有所述单个目的细胞。实验证明，利用本发明所提供的细胞芯片可检测待测药物对细胞的细胞毒性和/或检测待测药物对细胞的基因损伤和/或检测待测药物对细胞中目的蛋白表达的影响和/或筛选对细胞具有效果的高内涵药物。本发明所提供的细胞芯片具有重要的应用价值。

主权项

1.一种细胞芯片，包括支持介质和附着于所述支持介质上方的琼脂糖凝胶膜；所述琼脂糖凝胶膜上分布有若干个微阱，每个微阱的大小与单个目的细胞的大小相匹配；每个微阱内附着有所述单个目的细胞；所述细胞芯片的制备方法，依次包括如下步骤：（1）取微阵列芯片，用纤连蛋白溶液浸泡；所述微阵列芯片包括支持介质和附着于所述支持介质上方的琼脂糖凝胶膜；所述琼脂糖凝胶膜上分布有若干个微阱，每个微阱的大小与单个目的细胞的大小相匹配；所述琼脂糖凝胶膜是用标准熔点琼脂糖水溶液制备的；所述步骤（1）中，所述纤连蛋白溶液为200μg/mL的纤连蛋白水溶液；所述支持介质为GelBond Film；所述琼脂糖凝胶膜用标准熔点琼脂糖水溶液制备的；所述标准熔点琼脂糖水溶液为0.5g/100mL～1.5g/100mL的标准熔点琼脂糖水溶液；所述琼脂糖凝胶膜为长方体状，长度为1.6cm，宽度为1.6cm、高度为300μm；所述琼脂糖凝胶膜上以阵列方式均匀分布6.4×103个微阱；每个所述微阱的直径为20～50μm、深度为60～80μm；所述微阵列芯片的制备过程中，需在模具中加入增加模具的疏水性的物质，处理一定时间；所述增加模具的疏水性的物质为三氯硅烷；所述处理一定时间为真空处理，处理时间为2h～4h，处理温度为75～90℃；（2）完成步骤（1）后，将加样装置置于在所述微阵列芯片上方，通过加样孔将所述目的细胞的细胞悬液加入所述微阱中；所述加样装置上具有若干个通孔，每个通孔作为一个加样孔，每个加样孔对应1×103～4×103个所述微阱；所述步骤（2）具体为：通过所述加样孔将目的细胞的细胞悬液加入微阱中，静置10min；所述目的细胞的细胞悬液的浓度为1×106～1×108个/mL；所述步骤（2）和所述步骤（3）之间包括如下步骤（A）：在25℃条件下，用pH7.4、0.01M的PBS缓冲液冲洗2次；所述目的细胞为人脑胶质瘤细胞SF767、人脑胶质瘤细胞SF763或人肺癌细胞A549；所述加样装置为多孔板；所述多孔板为长方形状，长度为12.5cm、宽度为8.5cm、厚度为1.5cm；上述制备方法中，还包括如下步骤（3）：完成步骤（2）后，用琼脂糖凝胶覆盖微阱中的细胞；所述琼脂糖凝胶是用低熔点琼脂糖水溶液制备的；所述覆盖的厚度为100μm；所述琼脂糖凝胶膜用低熔点琼脂糖水溶液制备的；所述低熔点琼脂糖水溶液为0.4g/100mL～0.8g/100mL的低熔点琼脂糖水溶液。