[发明专利]一种免疫组化操作方法有效
申请号: | 201610334601.5 | 申请日: | 2016-05-19 |
公开(公告)号: | CN105973681B | 公开(公告)日: | 2018-12-28 |
发明(设计)人: | 欧阳小峰;刘叶;谷和林;李军秀 | 申请(专利权)人: | 四川金域医学检验中心有限公司 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N1/44;G01N21/78 |
代理公司: | 成都行之专利代理事务所(普通合伙) 51220 | 代理人: | 梁田 |
地址: | 610000 四川省成*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种免疫组化操作方法,1)切片、拷片;2)脱蜡和水化;3)抗原修复;4)封闭内源性过氧化氢酶;5)染色;6)滴加I抗;7)滴加II抗;8)显色:采用DAB显色剂,室温下显色;9)封片。本发明所采用的技术方案改变了常规操作步骤在滴加I抗、II抗之前采用苏木素染色,利于滴加I抗、II抗后抗体显色。本发明操作步骤简单,仅对现有操作步骤的操作顺序及采用的试剂、操作的时间进行改变,即可实现现有操作效果的改变,染色后滴入抗体,便于把握组织的大小和位置。本发明操作步骤简单且能有效的解决实验检验分析中一些技术细节问题,利于实验规范操作,且能够避免实验试剂的浪费,也尽量减少了实验中的一些误差。 | ||
搜索关键词: | 一种 免疫 操作方法 | ||
【主权项】:
1.一种免疫组化操作方法,其特征在于,包括以下步骤:1)切片、拷片:将组织切片在室温下放置60min或60℃下烘烤20min;2)脱蜡和水化:将组织切片置于二甲苯中浸泡10分钟,更换二甲苯后再浸泡10分钟,然后依次在无水乙醇、95%乙醇、70%乙醇中分别浸泡5分钟;3)抗原修复:在电炉或水浴锅内加热pH为6.0的0.01M枸橼酸钠缓冲溶液至95℃,放入组织切片加热10—15分钟;4)封闭内源性过氧化氢酶:采用0.3%过氧化氢甲醇浸泡30分钟;5)染色:采用苏木素染色2分钟;6)滴加I抗:滴加I抗50微升,室温静置1小时或4℃过夜或37℃1小时;7)滴加II抗:滴加II抗40—50微升,室温下静置或37℃1小时;8)显色:采用DAB显色剂,室温下显色;9)封片;其中,所述步骤4)中浸泡30分钟后依次采用蒸馏水清洗6分钟,PBS漂洗6分钟;其中,所述步骤5)采用苏木素然后用盐酸酒精分化;其中,所述步骤7)II抗中加入0.05%的tween‑20。
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