[发明专利]一种快速获得和纯化骨髓基质干细胞的方法在审
| 申请号： | 201610335385.6 | 申请日： | 2016-05-19 |
| 公开（公告）号： | CN105861431A | 公开（公告）日： | 2016-08-17 |
| 发明（设计）人： | 周佳;厉民;王峥 | 申请（专利权）人： | 浙江省人民医院 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 杭州九洲专利事务所有限公司 33101 | 代理人： | 张羽振 |
| 地址： | 310014 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种快速获得和纯化骨髓基质干细胞的方法，包括如下步骤：将从骨髓腔获得的骨髓基质细胞(P0)利用含抗凝剂的无血清细胞培养液重悬；所获P0细胞悬液用含血清培养液进行培养，用复合胶原酶差速消化法，获得第一代骨髓基质干细胞(P1)；用流式细胞仪对干细胞表面CD标记和非干细胞表面CD标记进行双重荧光区分，迅速提高骨髓干细胞比例；再次用含血清培养液培养；最后再次通过复合胶原酶差速消化的方法，获得高纯度的第二代骨髓基质干细胞(P2)。本发明的有益效果是：采用含有抗凝剂的无血清培养基α‑MEM重悬从骨髓腔获取的骨髓基质细胞(P0)，防止造血细胞聚集沉降在培养皿底，干扰骨髓基质干细胞的贴壁。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 获得 纯化 骨髓 基质 干细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种快速获得和纯化骨髓基质干细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)将从骨髓腔获得的骨髓基质细胞(P0)利用含抗凝剂的无血清细胞培养液重悬；2)所获P0细胞悬液用含血清培养液进行培养，用复合胶原酶差速消化法，获得第一代骨髓基质干细胞(P1)；3)用流式细胞仪对干细胞表面CD标记和非干细胞表面CD标记进行双重荧光区分，迅速提高骨髓干细胞比例；4)再次用含血清培养液培养；5)最后再次通过复合胶原酶差速消化的方法，获得高纯度的第二代骨髓基质干细胞(P2)。
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