[发明专利]一种分离培养脐静脉血管内皮细胞的方法在审
| 申请号： | 201610336519.6 | 申请日： | 2016-05-20 |
| 公开（公告）号： | CN105907704A | 公开（公告）日： | 2016-08-31 |
| 发明（设计）人： | 刘东;曲廷瑜;张秀涛 | 申请（专利权）人： | 山东省齐鲁干细胞工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 刘丽 |
| 地址： | 250102 山东省济南市*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及生物技术领域的成体细胞的分离培养领域,尤其涉及一种分离培养脐静脉血管内皮细胞的方法：将脐静脉从华通胶中完全剥离出来；将脐静脉沿一侧纵向剪开，使其由管状变为长方形血管壁面，漂洗；加入Ⅱ型胶原酶进行消化；消化完成后将血管取出漂洗，漂洗液与酶解液混合，离心弃上清，使用培养基进行培养。本发明的细胞分离方法操作简单，单人可独立进行，且红细胞污染较少，可细胞接种后72h再进行换液，细胞贴壁效率更高；原代所得到的血管内皮细胞数量多，P3细胞CD31阳性表达可达95%以上，且在分离制备血管内皮细胞同时不影响脐带间充质干细胞的制备，可充分利用实验材料。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分离 培养 静脉 血管 内皮 细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种分离培养脐静脉血管内皮细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）脐带清洗后将脐静脉从华通胶中完全剥离出来；（2）将脐静脉沿一侧纵向剪开，使其由管状变为长方形血管壁面，然后使用无菌生理盐水对血管壁进行漂洗直至漂洗液澄清无色；（3）加入Ⅱ型胶原酶进行消化，Ⅱ型胶原酶质量体积比浓度为0.05%‑0.1%,酶和脐静脉的配比为0.25‑0.5mＬ:1cm长血管，消化时间为15‑30min，消化在恒温摇床内进行，消化温度为37℃，摇床转速为120r/min；（4）消化完成后将血管取出并使用α‑MEM培养基对血管进行漂洗，漂洗液与酶解液混合，离心后弃掉上清，使用培养基进行培养。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东省齐鲁干细胞工程有限公司，未经山东省齐鲁干细胞工程有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201610336519.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
