[发明专利]一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的提纯方法在审
申请号: | 201610339049.9 | 申请日: | 2016-05-19 |
公开(公告)号: | CN106011196A | 公开(公告)日: | 2016-10-12 |
发明(设计)人: | 卢英华;薛成凤;吴意珣;凌雪萍;敬科举;姚传义 | 申请(专利权)人: | 厦门大学 |
主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;C08B37/00;C12R1/225 |
代理公司: | 厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200 | 代理人: | 马应森 |
地址: | 361005 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的提纯方法,涉及胞外多糖。从保种的MRS固体培养基上选取单菌落接至MRS液体培养基中培养得已活化的发酵液;在MRS液体培养基中添加终浓度为10mM的CaCl2,取已活化的发酵液进行转接,得转接后的发酵液,取培养0,2,4,6,12,24h的1ml转接后的发酵液测定OD600、pH值;取中转接后的发酵液,除去细胞与蛋白之后,加入冰乙醇,冰箱里过夜,离心,去除上清留沉淀,将沉淀冷冻干燥后取出,透析,再冷冻干燥后即得粗胞外多糖,然后溶解于纯水中,取经过透析冻干后的粗胞外多糖样品溶于蒸馏水中,配制20mg/mL的溶液,离心,取上清液离子柱层析得鼠李糖乳杆菌胞外多糖。 | ||
搜索关键词: | 一种 鼠李糖乳 杆菌 多糖 提纯 方法 | ||
【主权项】:
一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的提纯方法,其特征在于包括以下步骤:1)从保种的MRS固体培养基上选取单菌落接至MRS液体培养基中培养,得已活化的发酵液;2)在MRS液体培养基中添加终浓度为10mM的CaCl2,取步骤1)中已活化的发酵液进行转接,得转接后的发酵液,取培养0,2,4,6,12,24h的1ml转接后的发酵液测定OD600、pH值;3)取步骤2)中转接后的发酵液,除去细胞与蛋白之后,按体积比1∶3加入冰乙醇,冰箱里过夜,然后离心,去除上清留沉淀,将沉淀冷冻干燥后取出,透析,再冷冻干燥后,即得粗胞外多糖;4)将步骤3)所得的粗胞外多糖溶解于纯水中,取经过透析冻干后的粗胞外多糖样品,溶于蒸馏水中,配制20mg/mL的溶液,离心,取上清液离子柱层析,得鼠李糖乳杆菌胞外多糖。
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