[发明专利]一种金铃花快速繁殖的方法

摘要

本发明涉及一种金铃花快速繁殖的方法，所述的方法包括：1)外植体的选取，2)外植体消毒，3)初始诱导培养，4)愈伤组织诱导，5)增殖培养，6)生根培养，7)炼苗和移栽。采用本方法繁育金铃花，可以降低生产成本，提高繁殖速度和成活率。

主权项

一种金铃花快速繁殖的方法，其特征在于所述的方法包括以下步骤：1)外植体的选取：取当年生直径10‑20mm的金铃花半木质化嫩枝枝条为外植体，剪去下部叶片后剪成5‑12cm的茎段；2)外植体消毒：将上述茎段放入盛有自来水的20KHz超声波清洗机中保持温度30‑35℃处理30‑45min，然后用自来水冲洗10‑20min；随后在超净工作台上以70‑75％的酒精消毒20‑30秒，0.5％升汞溶液中处理5‑7分钟，然后以无菌水冲洗6‑8遍，置于无菌培养皿备用；3)初始诱导培养：将灭菌后外植体茎段各剪去3‑5mm，茎段按末端向下插入初始诱导培养基中培养，培养条件为光强2500‑3500Lx、光周期10‑14h/d,温度25℃±2℃；培养4‑6d后将其中未污染的外植体茎段转接到新的初始诱导培养基中，并继续培养12‑18d至新芽长出；所述的初始诱导培养基组成为：WPM+6‑BA0.1‑0.2mg/L+NAA0.01‑0.02mg/L+PVP5‑10mg/L；4)愈伤组织诱导：取初始诱导培养中的芽，放入愈伤组织诱导培养基中培养15‑20d，条件为暗培养，温度20℃±2℃；所述愈伤组织培养基为：WPM+6‑BA0.5‑2.0mg/L+NAA0.02‑0.05mg/L+PVP5‑10mg/L；5)分化和增殖培养：将透明无色的愈伤组织块放入分化培养基中培养20‑25d，增殖产生大量丛生苗，培养条件为光强1800‑2500Lx、光周期10‑14h/d,温度25℃±2℃；所述分化和增殖培养用培养基为：1/2MS+6‑BA0.1‑0.5mg/L+NAA0.1‑0.5mg/L+PVP 5‑10mg/L；6)生根培养：将5)步骤中的丛生苗切割成单个，转移至生根培养基中培养15‑20d后生根，培养条件为光强1800‑2500Lx、光周期10‑14h/d,温度25℃±2℃；所述生根用培养基为：1/2MS+IBA0.1‑0.5mg/L+PVP5‑10mg/L；7)炼苗和移栽：将有生根的金铃花幼苗的培养基瓶盖打开，室温下炼苗3‑5d后，取出幼苗，洗去根部培养基，移栽装有河沙基质的苗床上，保持温度20‑25℃，湿度85％‑95％，适当遮荫即可；所述的6‑BA为6‑苄氨基嘌呤；所述的NAA为α‑萘乙酸；所述的IBA为吲哚‑3‑丁酸；所述的PVP为聚乙烯吡咯烷酮。