[发明专利]毕赤酵母重组子表达人源SOD的研究在审
申请号: | 201610340907.1 | 申请日: | 2016-05-20 |
公开(公告)号: | CN105861537A | 公开(公告)日: | 2016-08-17 |
发明(设计)人: | 肖纯凌;李新鸣;毕延波;张奕晶;孙冶;李舒音;海晓欧 | 申请(专利权)人: | 沈阳医学院 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N9/02;C12R1/84 |
代理公司: | 沈阳火炬专利事务所(普通合伙) 21228 | 代理人: | 李福义 |
地址: | 110034 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 毕赤酵母重组子表达人源SOD的研究,通过培养条件的优化,在500ml的三角瓶、装液量为20%、30℃、225rpm、Cu2+浓度为1%、甲醇浓度为1%,培养基24h时,重组毕赤酵母表达人源SOD的酶活力最高,可达到18.322U/ml。通过此发酵条件优化后,可以获得分泌型的SOD发酵液,并且具有酶活性的SOD产品。 | ||
搜索关键词: | 酵母 重组 表达 sod 研究 | ||
【主权项】:
毕赤酵母重组子表达人源SOD的研究,其特征在于,通过改变条件来优化目的蛋白的表达量,所述优化的培养条件包括:1)培养基;重组毕赤酵母在BMGY中培养进行诱导表达;2)通气;将有重组毕赤酵母的BMGY至于底部或侧壁有挡板的三角瓶中进行培养,三角瓶的容积尺寸500ml,培养基的体积需小于或等于三角瓶体积的10%‑30%,选用2‑3层棉纱布或是宽松的瓶塞盖在三角瓶上;3)温度和摇床震荡速度;将装有培养基的三角瓶至于恒温震荡培养箱中培养,温度设置为30℃;4)甲醇浓度;在重组毕赤酵母分泌表达SOD过程中,在其培养液中添加甲醇至甲醇终浓度为1%;5)铜离子浓度;在重组毕赤酵母分泌表达SOD过程中,在其培养液中添加硫酸铜至铜离子终浓度为1%;6)培养时间;将装有培养基的三角瓶置于恒温震荡培养箱中,在30℃下培养24h。
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