[发明专利]一种食用百合的脱毒及快速繁殖方法

摘要

一种食用百合的脱毒及快速繁殖方法，包括以下步骤：(1)外植体的选择及处理：(2)外植体的灭菌及生长点的剥取：(3)启动培养；(4)RT‑PCR病毒检测及丛生芽诱导培养；(5)鳞茎诱导及生根培养。利用本发明可以100％脱去百合体内主要病毒，特别是对于已经感染病毒的百合外植体经多次实验验证可以成功脱除，且成活率高达85％以上，此外，通过本发明在获得较高增殖系数的同时缩短百合生长周期，使百合在短时间内获得大量脱毒苗，满足生产的需求。 1

主权项

1.一种食用百合的脱毒及快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体的选择及处理：选择百合珠芽作为外植体，用水冲洗去除泥土后，在35‑40℃恒温箱中热处理10‑20天，保持相对湿度在85‑100％；(2)外植体的灭菌及生长点的剥取：将经过热处理后的百合珠芽加洗洁精在水中清洗，洗净表面粘液后，先用酒精浸泡，再用质量分数为0.1‑0.2％的升汞灭菌，然后用无菌水清洗，洗净残液，备用；将灭菌后的百合珠芽置于体视显微镜下，先用解剖刀切下四周较大的鳞片，再用解剖针挑取0.4‑0.6mm大小的茎尖，接种在启动培养基中；(3)启动培养：启动培养基配方为:MS+8‑12mg/L病毒唑+0.5‑3.0mg/L 6‑BA+0.5‑2.0mg/L 2,4‑D+0.1‑0.5mg/L NAA+0.1‑0.5mg/L活性炭+5‑7g/L琼脂+20‑40g/L白糖，先暗培养5‑10天，再在光下培养，光强500‑1500Lx；(4)RT‑PCR病毒检测及丛生芽诱导培养：在启动培养基中培养50‑60天，待幼芽长出2‑3片叶时，取叶片进行RT‑PCR病毒检测，确定已脱除病毒则转入新的培养基中诱导丛生芽，丛生芽诱导培养基配方为：MS+2.0‑4.0mg/L 6‑BA+0.1‑0.5mg/L NAA+5‑7g/L琼脂+20‑40g/L白糖，光强500‑3000Lx；(5)鳞茎诱导及生根培养：在丛生芽诱导培养基中培养40‑60天后，转至鳞茎诱导培养基中培养，鳞茎诱导培养基配方为：MS+1.0‑3.0mg/L 6‑BA+0.1‑0.5mg/L NAA+0.2‑0.6mg/L活性炭+5‑7g/L琼脂+20‑40g/L白糖，在此培养基中培养50‑60天后，鳞茎发育较多且根系生长良好，直接成苗移栽。