[发明专利]一种适宜稻曲病菌产孢的核糖培养基及其应用方法

摘要

本发明公开一种适宜稻曲病菌产孢的核糖培养基及其应用方法，利用非高温灭菌的核糖制成马铃薯核糖培养基，作为产孢培养基，培养制备稻曲病菌薄壁分生孢子。该培养基的制备及其应用方法的操作步骤如下：1)制备基础培养基；2)核糖的过滤灭菌；3)制备核糖培养基平板；4)植入稻曲病菌；5)恒温培养；6)新一代孢子的收集。本发明的特色与优点是：获得大量孢子所需时间短，且持续产孢时间长；操作技术简易便捷，无需振荡培养设备；新一代孢子的数量较多且孢子液较为纯净。

主权项

一种适宜稻曲病菌产孢的核糖培养基及其应用方法，其特征在于，利用非高温灭菌的核糖制成马铃薯核糖培养基，作为产孢培养基，培养制备稻曲病菌薄壁分生孢子；培养基的制备及其应用方法的操作步骤如下：1)制备基础培养基：按配比为：马铃薯100g、琼脂20g、水900ml，制备基础培养基，每瓶装90ml，常规高温灭菌后备用；2)核糖的过滤灭菌：按配比为：核糖10g、水100ml，用水将核糖配成核糖溶液，在无菌条件下用细菌过滤器将该核糖溶液进行过滤灭菌，备用；3)制备核糖培养基平板：将步骤1)制备的基础培养基加热熔化，水浴平衡至60℃，同时将步骤2)过滤灭菌的核糖溶液在水浴中平衡至60℃，然后将二者同时转移到超净工作台无菌环境中，取10ml核糖溶液转入1瓶基础培养基中，摇动混合均匀后倒培养皿成为含有核糖的培养基平板；该培养平板的组分配比为：马铃薯100g，核糖10g，琼脂20g，水1000ml；4)植入稻曲病菌：取出以孢子形式备存的稻曲病菌孢子液，无菌条件下将该孢子液植入步骤3)准备完毕的培养平板，用T形玻棒将孢子液均匀涂布于平板面上；5)恒温培养：将步骤4)操作完毕的培养平板转入培养箱内，28℃恒温培养；6)新一代孢子的收集：步骤5)操作实施培养5天后，稻曲病菌能在培养平板上形成大量新一代薄壁分生孢子；将培养平板转到超净工作台上，用无菌水洗刷平板上的菌落，能获得新的纯净孢子液。