[发明专利]一种熟肉制品中N-二甲基亚硝胺检测方法

摘要

本发明公开了一种熟肉制品中N‑二甲基亚硝胺检测方法，所述检测方法包括标准品溶液溶液配制、待测样品溶液的制备、待测样品定性检测和定量检测等步骤。本发明通过简便、快速、高效的待测样品制备方法，并利用GC‑MS/MS分析仪，通过外标法建立标准曲线，检测、计算得到N‑二甲基亚硝胺的含量。该方法与传统的气相色谱‑质谱仪法相比，省去水蒸气蒸馏和水浴浓缩等步骤，操作更简单，所需仪器减少；且检出限更低，准确性更高。

主权项

1.一种熟肉制品中N‑二甲基亚硝胺检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：(1)配制不同浓度的标准品溶液：首先制备标准储备液，称取N‑二甲基亚硝胺标准品，用乙腈配制成N‑二甲基亚硝胺的浓度为1000mg/L的储备液，于4℃冰箱中避光保存；然后将标准储备液用乙腈配制成浓度分别为0.5ng/mL、1ng/mL、2.5ng/mL、4ng/mL、5ng/mL的标准品溶液备用；(2)待测样品溶液的制备：A、称取待测样品5.00g，加入乙腈中含1％醋酸的溶液10mL，在2500r/min转速下的涡混振荡器中涡混5min；B、再加入5g无水硫酸镁、1g氯化钠和1g柠檬酸二钠后涡混3min，然后在5000r/min转速下的离心机中离心5min后收集上清液；C、吸取6mL上清液移入装有0.5gPSA、0.5gC18和1g无水硫酸镁的15mL离心管中，涡混3min，在5000r/min转速下的离心机中再离心5min后收集上清液；D、再次取上清液，用0.22μm有机滤膜过滤后作为待测样品溶液；(3)待测样品定性和定量检测：A、取1.0μL待测样品溶液进样，用三重四级杆气相色谱‑质谱联用仪分析检测，得到待测样品溶液的总离子流色谱图、定量离子对色谱图和定性离子对相对丰度色谱图；所述三重四级杆气相色谱‑质谱联用仪分析检测时所采用的参数分别为：a、色谱条件色谱柱为安捷伦HP‑INOWAX毛细管色谱柱，进样口温度250℃，不分流进样，载气流速0.887mL/min，载气中氦气≥99.999％，进样量1μL；程序升温：初始温度60℃保持1min，以40℃/min升到120℃，然后再以5℃/min升到250℃保持3min；b、质谱条件离子源：230℃，四级杆：150℃，传输线：250℃，扫描模式MRM，电离能量70eV，溶剂延迟4.5min；B、将步骤(1)配制的不同浓度的N‑二甲基亚硝胺标准品溶液，用三重四级杆气相色谱‑质谱联用仪分析检测，检测条件与待测样品溶液相同，获得标准品溶液的总离子流色谱图、定量离子色谱图和定性离子对相对丰度色谱图；C、以N‑二甲基亚硝胺的定量离子对和定性离子对的色谱峰制作得到N‑二甲基亚硝胺标准曲线；D、根据待测样品溶液中N‑二甲基亚硝胺的定量离子对和定性离子对的色谱峰，结合标准曲线，计算得到待测样液中N‑二甲基亚硝胺的浓度C，并按以下公式计算得到熟肉制品中N‑二甲基亚硝胺的含量X，含量计算公式为：X＝C*V/(M*1000)其中X为待测样品中N‑二甲基亚硝胺的含量，单位为mg/kg；C是待测样品中N‑二甲基亚硝胺的浓度，单位为ng/mL；V是待测样品溶解体积，单位为mL；M是待测样品质量，单位为g。