[发明专利]用于检测磺胺类化合物的组合检测试剂及其检测方法

摘要

本发明提供了用于检测磺胺类化合物的组合检测试剂及其检测方法，所述组合检测试剂包括含有多种磺胺类化合物对照品的有机溶剂溶液和蛋白沉淀剂。本发明提供的组合检测试剂可以同时分析检测28种磺胺类化合物，检测范围广泛；样品处理中采用蛋白沉淀或液液萃取的方案，对生物样品中的28种磺胺类化合物进行净化和富集；应用本发明所述组合试剂的检测方法具有简便、准确、快速、稳定、样本量少的优点，而且无需衍生化、酶转化等复杂步骤，前处理过程应用的化学试剂少，绿色环保，检测结果不受内源性物质的干扰，假阴性假阳性率低，试剂成本低廉，适用于大量样本的快速分析。

主权项

利用用于检测磺胺类化合物的组合检测试剂的检测方法，其特征在于所述检测方法包括以下步骤：（1）生物样品预处理：对待检测样品利用液液萃取法、蛋白沉淀法或滤膜过滤法进行预处理；（2） 取所述含有多种磺胺类化合物对照品的有机溶剂溶液直接进样；获得每种磺胺类化合物的标准曲线；得到线性方程、相关系数和线性范围；（3）对预处理后的待检测样品进行液相色谱串联质谱检测：色谱条件：色谱柱: ACQUITY UPLCTM BEH C18柱，50 mm × 2. 1 mm，1. 7 μm；柱温40 ℃；进样体积5 μl；采用硅胶键合相填料柱，流动相由A相+B相组成：A相为乙腈水，乙睛和水的体积比为5：95，A相含体积比为0.03%的甲酸；B相为乙腈，含体积比为0.03%的甲酸或乙酸；A相：B相的体积比为1‑99%：99‑1%，流速0. 3 ml /min；质谱条件: 采用电喷雾电离源ESI正离子的离子化模式，进行多反应监测MRM扫描，气帘气35~40 psi，离子化电压+5500 V，温度450~550 °C，喷雾气40~55 psi，辅助加热气40~60 psi，接口加热气 On，碰撞气Medium；（4）将质谱检测得到的各磺胺类化合物的峰面积，代入步骤（2）中对照品获得的标准曲线，得到对应磺胺类化合物的含量；所述组合检测试剂包括：含有多种磺胺类化合物对照品的有机溶剂溶液和蛋白沉淀剂，含有的每种磺胺类化合物对照品在有机溶剂溶液中的浓度均为0.1 ng‑20 ng/mL，所述蛋白沉淀剂为甲醇、乙腈或乙酸乙酯。