[发明专利]一种基于近红外上转换发光标记和磁分离的赭曲霉毒素A检测方法

摘要

一种基于近红外上转换发光标记和磁分离的赭曲霉毒素A检测方法，用于小麦及其制品等中赭曲霉毒素A(OTA)含量的检测。通过将NaYF₄:Yb_0.2,Tm_0.02近红外上转换发光材料与赭曲霉毒素A核酸适配体连接形成信号探针，再通过碱基互补配对原则与适配体互补寡核苷酸单链修饰的Fe₃O₄磁性纳米材料形成纳米复合物，此时上转换发光信号达到最大；当检测体系中存在OTA时，OTA与OTA适配体特异性结合，从而使双链解链，通过监控近红外光区804nm处的上转换发光信号强度，能够定量检测OTA，线性范围为0.01‑100ng/mL，检出限为0.005ng/mL。本发明用于OTA检测具有灵敏度高、快速简便的优点，并应用于啤酒样品的检测，结果准确可靠。

主权项

一种基于近红外上转换发光标记和磁分离的赭曲霉毒素A检测方法，其特征在于：将赭曲霉毒素A(OTA)适配体与近红外NaYF₄:Yb_0.2,Tm_0.02上转换发光纳米材料偶联形成信号探针，同时生物素化OTA适配体互补寡核苷酸单链与Fe₃O₄磁性纳米材料连接形成磁性探针，通过双链杂交形成NaYF₄:Yb_0.2,Tm_0.02近红外上转换发光纳米材料—Fe₃O₄磁性纳米材料复合物；向检测体系中加入OTA，OTA会优先与适配体结合，导致互补链与OTA适配体解离，从而使一部分NaYF₄:Yb_0.2,Tm_0.02近红外上转换发光纳米材料—Fe₃O₄磁性纳米材料复合物分解，充分磁分离去上清后，利用980nm激发，收集上转换发光在804nm处的发光信号；在0.01‑100ng/mL浓度范围内，OTA的浓度与804nm处上转换发光信号变化呈正相关，建立标准曲线，达到对OTA的定量检测，可用于啤酒中OTA的检测。