[发明专利]一种动物源食品中氨基糖苷类抗生素残留量的检测方法

摘要

本发明公开了一种动物源食品中氨基糖苷类抗生素残留量的检测方法，具体涉及一种基于HILIC色谱柱串联三重四级杆质谱，检测动物源食品中氨基糖苷类抗生素残留量的检测方法。其特征在于：样品经过提取、固相萃取、经ZIC‑HILIC色谱柱分离后，由三重四级杆质谱测定。所检测的新霉素、大观霉素、双氢链霉素、链霉素、庆大霉素的浓度在10ug/kg‑500ug/kg范围内线性关系良好，20μg/kg浓度下响应值良好S/N＞10，样品真度无明显基质效应，样品中浓度检出限可降低至100ug/kg，与现有技术相比，本发明所述方法，具有样品前期处理时间短成本低、方法简便、基质覆盖全面、准确度高等特点。

主权项

1.一种动物源食品中氨基糖苷类抗生素残留量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(一)样品前处理称取试料2.5±0.02g，于50mL离心管中，加入20mL提取液，提取液浓度为10mM乙酸铵+0.4mMEDTA+1％氯化钠+5％三氯乙酸，涡旋混合30s，振荡混合10min，4000r/min离心5min，上清液用20％的氢氧化钠或1M的盐酸水溶液调pH至6.5；(二)固相萃取固相萃取SPE柱依次用甲醇5mL和水5mL活化，取上述步骤中的上清液过柱处理，用5mL水淋洗，抽干，加0.5M甲酸铵5mL洗脱，收集洗脱液，涡旋混匀，经0.22μm滤膜过滤，即为待测样品；0.5M甲酸铵的pH＝3；(三)ZIC‑HILIC色谱柱‑三重四极杆质谱检测三重四级杆质谱检测参数为：离子源：ESI源，雾化气流速：3L/min，加热气流速：10L/min，离子源温度：300℃，DL管温度：250℃，加热模块温度：400℃，干燥气流量：10L/min；基于ZIC‑HILIC色谱柱的检测参数为：色谱柱：ZIC‑HILIC，规格为150mm×4.6mm×3.5μm；流动相A：175mmol/L甲酸铵，pH＝4.5；流动相B：含有0.3％甲酸的乙腈；流速：0.55mL/min；进样体积：20μL；柱温箱温度：45℃；洗脱方式：梯度洗脱，初始浓度为B相60％，10min为B相15％，20min为B相15％，20.1min为B相60％，30min洗脱结束；清洗液：80％乙腈水溶液；(四)通过绘制标准曲线及测算，得出样品中氨基糖苷类抗生素的含量。