[发明专利]一种细菌纤维素生产菌株的活菌计数方法有效
申请号: | 201610355676.1 | 申请日: | 2016-05-26 |
公开(公告)号: | CN105861622B | 公开(公告)日: | 2019-07-09 |
发明(设计)人: | 钟成;刘淼;邓婷月;贾士儒;郑鑫;杨啸天;谭之磊;韩培培 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C12Q1/06 | 分类号: | C12Q1/06 |
代理公司: | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人: | 赵瑶瑶 |
地址: | 300222 天津市河*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种细菌纤维素生产菌株的活菌计数方法,⑴制备菌体粗悬液;⑵方法三中所得粗悬液经离心后,获取菌体,以含一定量纤维素酶的生理盐水或磷酸盐缓冲液将菌体重悬,至初始体积;⑶梯度稀释:先向梯度稀释液中添加一定量的纤维素酶,再进行梯度稀释实验;⑷充分混匀后,涂布计数或倾注计数。本方法以纤维素酶将菌体从细菌纤维素中释放,制得均匀的菌悬液。并通过向梯度稀释液中添加纤维素酶,达到充分降解菌体间连接的纤维素丝的目的,避免在计数过程中,由于纤维素的存在使菌体无法完全区分,造成菌落聚集或无法计数,该方法应用于涂布计数和倾注计数法时,菌体分离效果极好。 | ||
搜索关键词: | 一种 细菌 纤维素 生产 菌株 计数 方法 | ||
【主权项】:
1.一种细菌纤维素生产菌株的活菌计数方法,其特征在于:步骤如下:⑴制备菌体粗悬液;培养菌体,将发酵液中的纤维素降解至无肉眼可见纤维丝;⑵菌体粗悬液在纤维素被完全降解后,离心获取菌体,以含纤维素酶的生理盐水或磷酸盐缓冲液将菌体重悬,至初始体积;⑶梯度稀释:先向梯度稀释液中添加纤维素酶,再进行梯度稀释实验;梯度稀释液中纤维素酶含量0.5 U‑10 U;⑷充分混匀后,涂布计数或倾注计数。
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