[发明专利]耐高温脂肪酶的制备方法有效
| 申请号： | 201610361673.9 | 申请日： | 2016-05-26 |
| 公开（公告）号： | CN105802937B | 公开（公告）日： | 2019-10-29 |
| 发明（设计）人： | 胡爱红;朱晓媛;莫章桦 | 申请（专利权）人： | 湖南南北旺生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/20 | 分类号： | C12N9/20;C12N15/55;C12N15/81 |
| 代理公司： | 长沙朕扬知识产权代理事务所(普通合伙) 43213 | 代理人： | 魏龙霞 |
| 地址： | 410217 湖南省*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种耐高温脂肪酶的制备方法，包括以下步骤：将来源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的耐高温脂肪酶基因克隆至毕赤酵母(Pichia pastoris)中；再对毕赤酵母进行活化处理，然后将活化处理后的毕赤酵母单菌落接种于摇瓶中进行摇瓶培养；将摇瓶培养的菌液移至种子罐中进行培养；将种子罐培养的菌液移至发酵罐中进行发酵培养；最后在发酵液中加入脂肪酶协同剂，经吸附、干燥后，即得到所述脂肪酶。本发明制备方法获得的脂肪酶，能耐受较高温度，较宽的pH作用范围和对有机溶剂良好的耐受性等特点，扩大了脂肪酶的应用领域，解决了饲料制粒中脂肪酶不耐温的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 耐高温 脂肪酶 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种耐高温脂肪酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将来源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的耐高温脂肪酶基因克隆至毕赤酵母(Pichia pastoris)中；（2）对经步骤（1）处理后的毕赤酵母进行活化处理，然后将活化处理后的毕赤酵母单菌落接种于摇瓶中进行摇瓶培养；（3）将摇瓶培养的菌液移至种子罐中进行培养；（4）将种子罐培养的菌液移至发酵罐中进行发酵培养；（5）在步骤（4）得到的发酵液中加入脂肪酶协同剂，经吸附、干燥后，即得到所述脂肪酶；所述脂肪酶协同剂由聚乙烯胺、环糊精和玉米淀粉组成；其中所述聚乙烯胺的质量与发酵液体积比值为0.1%；环糊精的添加与发酵液体积的比值为1%；所述比值单位为Kg/L；干燥的过程采用喷雾干燥，干燥的温度不超过100℃；最终得到的脂肪酶产品水分不超过10%。
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