[发明专利]一种罗汉果外植体生芽培养方法

摘要

本发明提供的一种罗汉果外植体生芽培养技术，属于组织培养技术，包括制作罗汉果组培苗、外植体扦插在在滤纸。与现有技术相比，本发明的技术能够快速诱导罗汉果组织块径的形成，同时芽苞长至0.5～1cm，根系初步冒出，该方法可以实现95％的成功率，整个方法简单易操作，并且可实现大批量生产。

主权项

1.一种罗汉果外植体生芽培养方法，其特征在于包括以下步骤：1)使用常规方法制作罗汉果组培苗，并取中间健壮部分，分切成带腋芽单节茎段，并进行灭菌处理，得到外植体； (1)用浓度为 3％的肥皂水浸泡 5min，捞起后使用无菌水冲洗一次；(2)再用浓度为 0.05％的柠檬酸溶液浸泡 5min，捞起后使用无菌水冲洗一次；(3)再用浓度 50～60％的酒精溶液浸泡 15s，捞起后使用无菌水冲洗 一次；(4)再使用浓度为 0.1％的高锰酸钾溶液浸泡 3min，捞起后使用无菌水冲洗一次，得到灭菌的罗汉果外植体；(5) 得 到 的 灭 菌 的 罗 汉 果 外 植 体 用 滤 纸 包 裹 ， 并 对 滤 纸 喷 洒MS+BA0.6mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖 30g/L 的溶液喷洒，使得滤纸足够湿润；2)将外植体扦插在滤纸上，滤纸延伸到培养基溶液中；所述滤纸到培养基溶液的高度不超过 4cm；先黑暗培养 3d，然后在光照长度 1000～1200Lx，光照时间10～12h/d，培养温度为 23～25℃；所述的培养基溶液由以下原料组成：MS+BA0.5～0.7mg/L、IAA0.1～0.2mg/L、蔗糖 30g/L、硝酸铵 1～4g/L、芒果泥 5～10g/L；在将外植体扦插在在滤纸前，对滤纸喷洒以下溶液：MS+BA0.5～0.7mg/L、IAA0.1～0.2m。