[发明专利]一种罗汉果组织块茎生根培养技术

摘要

本发明提供的一种罗汉果组织块茎生根培养技术，包括使用常规方法制作罗汉果组培苗；组织块茎扦插在滤纸上，滤纸延伸到液体培养基溶液中；组织块茎扦插于固体培养基中培养60～80d，即可移栽至土地中。使用该发明提供的方法处理的罗汉果组织块茎能够实现快速生根，得到的罗汉果幼苗的根须长达5cm以上，其移栽成活率达到90％以上。

主权项

1.一种罗汉果组织块茎生根培养方法，其特征在于包括以下步骤：1)使用常规方法制作罗汉果组培苗，并取中间健壮部分，分切成带腋芽单节茎段，并进行灭菌处理，得到组织块茎；具体方法为：(1)用浓度为3％的肥皂水浸泡5min，捞起后使用无菌水冲洗一次；(2)再用浓度为0.05％的柠檬酸溶液浸泡5min，捞起后使用无菌水冲洗一次；(3)再用浓度50～60％的酒精溶液浸泡15s，捞起后使用无菌水冲洗一次；(4)再使用浓度为0.1％的高锰酸钾溶液浸泡3min，捞起后使用无菌水冲洗一次，得到灭菌的罗汉果外植体。(5)得到的灭菌的罗汉果外植体用滤纸包裹，并对滤纸喷洒MS+BA0.6mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖30g/L的溶液喷洒，使得滤纸足够湿润；2)将组织块茎扦插在滤纸上，滤纸延伸到液体培养基溶液中；所述的滤纸到液体培养基溶液的高度不超过4cm；先黑暗培养3d，然后在光照强度1000～1200Lx；光照时间10～12h/d，培养温度为23～25℃，培养时间15～20天；3)将组织块茎扦插于固体培养基中培养60～80d，即可移栽至土地中；所述的液体培养基的pH值为5.7～6.0；所述的固体培养基的pH值为6.2～6.4；所述的步骤3)的光照强度1200～1400Lx，光照时间13～15h/d，培养温度为27～29℃；所述的液体培养基溶液包含：MS+BA0.5～0.7mg/L、IAA0.1～0.2mg/L、蔗糖30g/L、硝酸铵1～4g/L、芒果泥5～10g/L；所述的固体培养基包括MS+BA1～2mg/L、AD0.5～1mg/L、蔗糖30g/L、硝酸铵1～4g/L、芒果泥20～30g/L、香蕉泥30～45g/L、灰炭土0.5～1g/L、卡拉胶5～10g/L。