[发明专利]表达AA9家族多糖单加氧酶基因TLAA9‑2的毕赤酵母工程菌株在审
| 申请号： | 201610366951.X | 申请日： | 2016-05-26 |
| 公开（公告）号： | CN106047737A | 公开（公告）日： | 2016-10-26 |
| 发明（设计）人： | 李多川;耿志刚;陈铭 | 申请（专利权）人： | 山东农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/53;C12N15/81;C12R1/84 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 271018 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种表达AA9家族多糖单加氧酶基因TLAA9‑2的毕赤酵母工程菌株，是通过RT‑PCR方法从疏绵状嗜热丝孢菌Thermomyces lanuginosus获得糖苷水解酶基因TLAA9‑2，将其克隆并插入到毕赤酵母整合表达载体pPICZαA中，然后将得到的糖苷水解酶基因TLAA9‑2表达载体pPICZαA/TLAA9‑2导入到毕赤酵母GS115中，再从中筛选出一种表达糖苷水解酶基因TLAA9‑2的酵母工程菌GS‑CT‑9‑1。该工程菌表达的糖苷水解酶TLAA9‑2对内切纤维素酶的活性具有明显的促进作用，混合酶比原始内切酶N24的降解纤维素的活性提高1.2倍。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 aa9 家族 多糖 单加氧酶 基因 tlaa9 酵母 工程 菌株 | ||
【主权项】：
一种表达疏绵状嗜热丝孢菌Thermomyces lanuginosusAA9家族多糖单加氧酶基因TLAA9‑2的酵母工程菌株，其特征在于该菌为一种毕赤酵母，通过RT‑PCR方法从疏绵状嗜热丝孢菌Thermomyces lanuginosus获得热稳定AA9家族糖苷水解酶基因TLAA9‑2,将该基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA,获得表达重组质粒pPICZαA/TLAA9‑2,转化毕赤酵母GS115,从中筛选出表达热稳定多糖单加氧酶基因TLAA9‑2的毕赤酵母工程菌株GS‑CT‑9‑2，该糖苷水解酶TLAA9‑2对内切纤维素酶的活性具有明显的促进作用，并且能够将磷酸膨胀纤维素氧化裂解为纤维寡糖，飞行质谱结果鉴定裂解纤维素长链主要产物为纤维寡糖。
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