[发明专利]猪血木栽培苗快速繁育方法

摘要

本发明提供一种猪血木栽培苗快速繁育方法，包括外植体选择与消毒、无菌苗培养、从生芽诱导、生根培养、壮苗培养和苗床培养等步骤。与猪血木传统育苗方法相比，本发明的方法所需猪血木种子少，可短时大量繁殖并能保持猪血木优良的遗传性状，幼苗品质好，畸形苗率低，幼苗成活率高达90％，栽培苗成活率高达80％，且移栽后，苗木长势好，无“小老头苗”现象产生，有效解决了猪血木野生资源日益减少，种群自然更新困难的问题，为猪血木这一珍稀濒危植物的有效保护提供了技术支持。

主权项

1.一种猪血木栽培苗快速繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：A、取成熟的猪血木种子，将其置于含100g/L的牛奶树汁液的水溶液中于35℃下浸泡24‑36h后，取出，用线状自来水冲洗干净后，再将所述猪血木种子放入天然消毒液中浸泡30min，最后将所述猪血木种子用无菌水冲洗3‑5次并用消毒滤纸除去其表面水分，得外植体，其中，所述天然消毒液的制备方法为：将10‑12重量份代代、8‑10重量份白千层、8‑10重量份蓝桉、7‑9重量份大蒜、4‑6重量份柠檬草和3‑5重量份丁香粉碎至50‑100目，加入500重量份的水室温下浸泡1h，再于60℃下真空回流提取2‑4h，过滤，得滤液，再向所述滤液中加入15‑18重量份的竹醋液，混合均匀后即得所述天然消毒液；所述牛奶树汁液是将牛奶树的树皮用刀割开后，得到的白色汁液；B、将步骤A中得到的所述外植体置于无菌苗培养基中，于30‑35℃，第一光照条件下培养15‑18天，得无菌苗，其中，所述无菌苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括1.5‑2.0mg/L GA3，1.0‑1.5mg/L ZT，1.0‑1.5mg/L NAA，8‑10g/L牛奶树汁液，30g/L蔗糖和6g/L琼脂，pH值为5.8‑6.0；第一光照条件下培养时，光照强度为1800‑2000lux，光照时间为3‑4h/天；C、将步骤B中得到的所述无菌苗用无菌解剖刀切割成0.8‑1cm的小段并分别转接到丛生芽诱导培养基中，于25‑28℃，黑暗条件下培养2天后，转入第二光照条件下培养28‑30天，得丛生芽，其中，所述丛生芽诱导培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括3.0‑3.5mg/L ZT，2.0‑2.5mg/L NAA，1.0‑1.5mg/L 6‑KT，4‑6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.8‑6.0；第二光照条件下培养时，光照强度1800‑2000lux，光照时间为10‑12h/天；D、将步骤C中得到的所述丛生芽转接到生根养基中，于26‑28℃，黑暗条件下培养6天后，转入第三光照条件下培养18‑20天，得完整植株，其中，所述生根培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括1.5‑1.8mg/L多效唑，1.0‑1.5mg/L NAA，0.5‑1.0mg/L IBA，35g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.8‑6.0；第三光照条件下培养时，光照强度2000‑2200lux，光照时间为10‑12h/天；E、向所述生根培养基中加入0.5cm厚的无菌水，敞口培养7天后，将所述完整植株取出，转入壮苗培养基中，第四光照条件下培养28‑30天，得幼苗，其中，所述壮苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括1.0‑1.5mg/L NAA，1.0‑1.5mg/L ZT，0.5‑1.0mg/L多效唑，3‑5g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L琼脂，pH值为5.8‑6.0；第四光照条件下培养时，光照强度2000‑2200lux，光照时间为10‑12h/天，光照时培养温度为22‑26℃，非光照时培养温度为16‑20℃；F、将步骤E中得到的所述幼苗移栽到苗床中继续培养5‑6个月，得猪血木栽培苗，最后将所述猪血木栽培苗进行野外移栽。