[发明专利]一种胰蛋白酶抑制剂及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201610371225.7 | 申请日： | 2016-05-30 |
| 公开（公告）号： | CN105801690B | 公开（公告）日： | 2019-01-29 |
| 发明（设计）人： | 李玉英;王转花;赵伟伟 | 申请（专利权）人： | 山西大学 |
| 主分类号： | C07K14/81 | 分类号： | C07K14/81;A61K38/56;A61P31/10;A61P35/00;A23L3/3472 |
| 代理公司： | 山西五维专利事务所(有限公司) 14105 | 代理人： | 张福增 |
| 地址： | 030006 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种胰蛋白酶抑制剂，是从黑豆中提取纯化得到，其分子量为20.3kD，PI为4.6。该抑制剂不仅具有抑制胰蛋白酶活性，而且具有几丁质酶活性。其制备方法是将黑豆种子粉碎，脱脂，使用缓冲液抽提，硫酸铵盐析后获得粗蛋白，再经过DEAE‑FF阴离子交换层析及SephacrylTMS‑100HR凝胶排阻层析两步色谱分离纯化获得。该蛋白对木酶和尖孢镰刀菌的生长有明显的抑制作用，并且对肿瘤细胞的增殖具有一定的抑制作用。该胰蛋白酶抑制剂可作为食品防腐添加剂，农作物抗真菌侵害喷剂等，也可用于预防和治疗肿瘤的辅助药物等。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 胰蛋白酶 抑制剂 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种胰蛋白酶抑制剂在制备抗真菌药物中的应用；所述的真菌为木霉或尖孢镰刀菌；所述的胰蛋白酶抑制剂通过如下方法制得：将烘干的黑豆去皮，经高速粉碎机研磨成粉，通过石油醚脱脂，得粉末状黑豆脱脂粉；使用50mmol/LpH为8.0的Tris‑HCl缓冲液4℃下过夜搅拌浸提，加40％‑60％饱和度的硫酸铵盐析，将得到的沉淀用少量的pH为8.0的Tris‑HCl缓冲液溶解，上样于脱盐柱，得到黑豆蛋白粗提液；将得到的粗提液抽滤过膜，然后通过DEAE‑FF阴离子交换层析及SephacrylTMS‑100HR凝胶排阻层析，收集洗脱峰，真空冷冻干燥，得到其分子量为20.3kD的具有几丁质酶活性的黑豆胰蛋白酶抑制剂。
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