[发明专利]探针集成的功能核酸修饰电极直接电化学检测铅离子方法有效
申请号: | 201610372050.1 | 申请日: | 2016-05-31 |
公开(公告)号: | CN105891286B | 公开(公告)日: | 2018-12-18 |
发明(设计)人: | 洪华;张爱平;施筱迪;王海天;洪昱;王红卫;王超颖;申晓萍 | 申请(专利权)人: | 中华人民共和国南通出入境检验检疫局 |
主分类号: | G01N27/26 | 分类号: | G01N27/26;G01N27/333;G01N27/327;G01N27/48 |
代理公司: | 南通市永通专利事务所(普通合伙) 32100 | 代理人: | 葛雷 |
地址: | 226004 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种探针集成的功能核酸修饰电极直接电化学检测铅离子方法,将探针集成的功能核酸修饰电极浸入加有待测铅离子的缓冲液20~30分钟,取出洗涤并在0.1M的NaClO4电解质溶液中进行DPV测定,根据在0.1~0.6V范围内扫描记录的DPV峰电流信号的变化率来计算样品中的铅离子浓度。本发明选择性好、灵敏、简便、快速。 | ||
搜索关键词: | 探针 集成 功能 核酸 修饰 电极 直接 电化学 检测 离子 方法 | ||
【主权项】:
1.一种探针集成的功能核酸修饰电极直接电化学检测铅离子方法,其特征是: (1) 探针集成的功能核酸修饰电极的制备将金纳米粒子修饰电极置于加有1 μM巯基修饰的17E DNAzyme的缓冲溶液中自组装12小时;所述缓冲溶液是pH 7.5、含140 mM NaCl和5 mM KCl的20 mM Tris‑HCl溶液;取出电极用所述缓冲溶液清洗,再将电极置入到加有1mM巯基己醇的上述缓冲溶液中钝化2小时,用同样的缓冲溶液清洗除去未组装的巯基乙醇;最后将电极转移到含有1 μM的底物17DS溶液中组装12小时;所述底物17DS的3’端修饰二茂铁探针分子;再用上述缓冲溶液洗涤电极3次,得到探针集成的功能核酸修饰电极;(2)湖水水样中铅离子的检测将制备好的修饰电极浸入到一系列加有不同浓度的铅离子标准水样的缓冲溶液中浸泡25 min后,用上述缓冲溶液清洗电极2次;以0.1 M的NaClO4作为支持电解质溶液,进行DPV扫描测试,测试参数为:调整时间为50 ms,间隔时间为0.5 s,调制振幅为50 mV,阶跃电势为5 mV,扫描范围为0.1~0.6V;以DPV峰电流为纵坐标,铅离子浓度为横坐标,绘制标准工作曲线;采用湖水作为样品,湖水经过活性炭脱色后用0.22 μm滤膜过滤,再以15000转/min离心后,取上清液进行测定;将50 μL处理好的湖水水样加入到上述缓冲溶液中,按照上述测定步骤操作,测定其DPV峰电流,根据DPV峰电流变化率 (I0‑I)/I0,由标准曲线拟合的线性方程可以计算出水样中铅离子浓度。
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