[发明专利]一种快速筛选烈性噬菌体的方法

摘要

本发明公开了一种快速筛选烈性噬菌体的方法，其包括样本采集及噬菌体获取，测试细菌的活化和单菌落制备，然后将细菌单菌落及噬菌体进行十字交叉划线接种，筛选出具有裂解测试菌株的噬菌体。本发明提供的方法能够方便、快捷、准确地筛选到测试细菌专一性噬菌体，避免了细菌突变等不利因素对烈性噬菌体筛选的影响，有利于充分研究和挖掘自然界中噬菌体资源。

主权项

 一种快速筛选烈性噬菌体的方法，其特征在于，具体步骤为：1）从自然环境中采集样本，直接得到水体样本或者制备成悬浊液，然后过滤或者离心，得到噬菌体；2）将测试细菌接种于固体培养基上活化，转接到液体培养基进行培养；然后进行细菌单菌落培养，得到不同突变型菌株的单菌落；3）将固体培养基倒入培养皿，凝固后在培养皿背部标记多条长线，再以垂直交叉方式在每条长线上标记多条短线；沿着长线标记，接种步骤1）获取的噬菌体，沿着短线标记接种步骤2）中获得的单菌落，使得细菌单菌落与噬菌体形成垂直交叉；4）对步骤3）所得的培养皿置于测试细菌适宜生长的条件下培养12‑36小时，观察细菌与噬菌体交叉处是否有细菌被裂解现象；5）将显示出裂解活性的噬菌体和菌株进行标记，再将对应的噬菌体和对应单菌落共同接种于液体培养基扩大培养获取噬菌体，再重复步骤2）至步骤 4）中的操作进行复筛；将复筛后仍然具有裂解测试菌株的噬菌体提取液进行保存即可完成烈性噬菌体的筛选。