[发明专利]一种产高粘性多糖的细菌的筛选方法在审
申请号: | 201610378514.X | 申请日: | 2016-05-31 |
公开(公告)号: | CN105907682A | 公开(公告)日: | 2016-08-31 |
发明(设计)人: | 刘陈立;张炳照;邵翅;邓誉峰;程传号 | 申请(专利权)人: | 深圳先进技术研究院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20 |
代理公司: | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人: | 郝传鑫;熊永强 |
地址: | 518055 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种产高粘性多糖的细菌的筛选方法,首先采用含刚果红的显色培养基进行初筛,获取产多糖细菌;进而采用菌落拉丝,通过拉丝效果进一步复筛,获取产高粘性多糖的细菌,最后,选用低氮源浓度的发酵培养基对通过前两轮筛选的细菌进行发酵培养,通过发酵液粘度变化测定,从而实现高粘性多糖胶细菌的判定,达到筛获目标细菌的目的。本发明提供的筛选方法工作量较少,具有更好的筛选方向性和覆盖全面性,以及更高的筛选效率。 | ||
搜索关键词: | 一种 粘性 多糖 细菌 筛选 方法 | ||
【主权项】:
一种产高粘性多糖的细菌的筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)平板显色法筛获产多糖的细菌:将细菌培养基与刚果红溶液混合后形成刚果红显示培养基,将所述刚果红显示培养基铺板,制成刚果红显色平板;取分离纯化后的待筛细菌,将所述待筛细菌分别接种至所述刚果红显色平板上,20~37℃下静置培养24~48小时,观察菌落的颜色有无变深,若观察到菌落颜色变深,即为产多糖的细菌;(2)菌落拉丝法筛获产粘性多糖的细菌:将步骤(1)筛获的细菌接种于固体培养基上,在20~37℃下培养24~48h,待形成一定大小的菌落后,用无菌牙签接触菌落并轻轻向外拉丝,观察能否形成连续拉丝,若能形成连续拉丝,则为产粘性多糖的细菌;(3)低氮发酵法筛获产高粘性多糖的细菌:将步骤(2)筛获的细菌接种至低氮发酵培养基中,在温度为20~37℃、振摇速度为150~300r/min下进行振荡培养120‑168h,持续监测发酵液的粘度变化趋势,若发酵液的粘度持续升高,则为产高粘性多糖的细菌,即获得目标细菌。
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