[发明专利]一种提高扩增效率的PCR扩增分析方法在审
申请号: | 201610378961.5 | 申请日: | 2016-05-31 |
公开(公告)号: | CN105925566A | 公开(公告)日: | 2016-09-07 |
发明(设计)人: | 陈华;谭淼 | 申请(专利权)人: | 苏州海苗生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 上海恒锐佳知识产权代理事务所(普通合伙) 31286 | 代理人: | 张会娟 |
地址: | 215400 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明揭露一种提高扩增效率的PCR扩增分析方法,其步骤如下:第一步骤,设定第一次变性温度与时间,对目标基因进行第一次变性,第二步骤,设定第一次退火温度与时间,对变性的目标基因进行第一次退火;第三步骤,设定第一次延伸温度与时间,对退火后的目标基因进行延伸;第四步骤,循环PCR扩增,分别设定最有利于基因扩增的变性、退火与延伸的温度。增加实时温度确认,确定第一次循环中对PCR扩增效率最大化的各个温度值,在以后循环过程中进行循环温度变化设置,从而对系统中多个目标基因的扩增终点及扩增效率实现实时控制,实现对目标基因的有效扩增,通过实时控制优势目标基因的扩增终点,极大提高目标基因的扩增效率。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 扩增 效率 pcr 分析 方法 | ||
【主权项】:
一种提高扩增效率的PCR扩增分析方法,其特征在于,其步骤如下:第一步骤,设定第一次变性温度与时间,对目标基因进行第一次变性,并确认具体的温度值是目标基因的完成变性;第二步骤,设定第一次退火温度与时间,对变性的目标基因进行第一次退火;并确认具体的温度值是目标基因的完成结合;第三步骤,设定第一次延伸温度与时间,对退火后的目标基因进行延伸;,确认准确的延伸温度对引物和目标基因的结合影响最有利;第四步骤,循环PCR扩增,分别设定变性、退火与延伸的温度,各个阶段的温度确定为:根据第一步骤中目标基因的完成变性是的温度值对目标基因进行第二变性,再根据第二步骤中目标基因的完成变性是的温度值对目标基因进行第二次退火,再确认第三步骤中延伸温度对引物和目标基因的结合影响最有利的温度值进行第二次延伸。
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