[发明专利]一种利用重组枯草脯氨酸氨肽酶降解酪蛋白的方法有效
| 申请号： | 201610382986.2 | 申请日： | 2016-06-02 |
| 公开（公告）号： | CN105925650B | 公开（公告）日： | 2019-05-10 |
| 发明（设计）人： | 田亚平;汪克红;王开道;周楠迪 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C12N9/48;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用重组枯草脯氨酸氨肽酶降解酪蛋白的方法，属于酶工程、食品添加剂领域。本发明利用脯氨酸氨肽酶协同碱性蛋白酶和亮氨酸氨肽酶水解酪蛋白，游离氨基酸含量为3.968mg/mL，为未水解前的游离氨基酸含量的63倍，2000Da以上的多肽基本上已经不存在了，而180Da以下的小肽含量达到了36.66％，充分水解了暴露出的N端脯氨酸残基，游离的脯氨酸含量为0.044mg/mL，是未水解游离脯氨酸含量的3.67倍，提高了酪蛋白水解深度。本发明方法在食品和饮料中、在食品蛋白资源加工利用领域具有很好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 重组 枯草 脯氨酸 氨肽酶 降解 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
1.一种酪蛋白的水解方法，其特征在于，所述方法是依次用碱性蛋白酶、亮氨酸氨肽酶、脯氨酸氨肽酶进行水解；所述方法是配置浓度为1.5‑2.5％的酪蛋白溶液：(1)加入30000‑34000U/g酪蛋白的碱性蛋白酶，于40‑50℃下反应2.5‑3.5h，沸水浴10‑20min；(2)冷却后继续加入800‑1000U/g酪蛋白的亮氨酸氨肽酶，45‑50℃反应2.5‑3.5h，沸水浴10‑20min；(3)冷却后再加入400‑500U/g酪蛋白的脯氨酸氨肽酶，45‑50℃反应2.5‑3.5h，沸水浴10‑20min；所述脯氨酸氨肽酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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