[发明专利]用酶抑制剂分类检测碳青霉烯酶的方法

摘要

本发明涉及临床微生物细菌检测技术领域，具体涉及用酶抑制剂分类检测碳青霉烯酶的方法。该方法为先选用抗生素纸片和EDTA纸片，将已经检测的耐药待检菌制成0.5麦氏单位菌悬液并均匀涂抹至M‑H平皿表面，在涂布有待检菌的M‑H平皿表面上，将EDTA纸片置于M‑H平皿表面中央，在EDTA纸片周围分别贴上头孢他啶(CAZ)抗生素纸片、厄他培南(ETP)抗生素纸片、美罗培南(MER)抗生素纸片、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)抗生素纸片、头孢他啶/克拉维酸(CAZ/CLAV)抗生素纸片，且EDTA纸片与各抗生素纸片、两相邻抗生素纸片留有间距；采用35℃孵育16～18h，观察并分别记录EDTA纸片、各抗生素纸片抑菌环直径。本发明的用酶抑制剂分类检测碳青霉烯酶的方法成本低廉，结果可靠，重复性好，不需要特殊实验条件，易于推广应用。

主权项

用酶抑制剂分类检测碳青霉烯酶的方法，所述的碳青霉烯酶分为丝氨酸类(SCHBLs)和金属类(MCHBLs)两大类，其特征在于：包括酶抑制剂和酶底物，所述的酶抑制剂为EDTA、头孢他啶/克拉维酸(CAZ/CLAV)和哌拉西林/他唑巴坦(TZP)，所述的酶底物为头孢他啶(CAZ)、厄他培南(ETP)和美罗培南(MER)，所述的头孢他啶/克拉维酸(CAZ/CLAV)、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)、头孢他啶(CAZ)、厄他培南(ETP)和美罗培南(MER)以抗生素纸片为载体，所述的EDTA以纸片为载体；其具体步骤如下：(1)选用抗生素纸片和EDTA纸片；(2)将已经检测的耐药待检菌制成0.5麦氏单位菌悬液并均匀涂抹至M‑H平皿表面；(3)在涂布有待检菌的M‑H平皿表面上，将EDTA纸片置于M‑H平皿表面中央；(4)在EDTA纸片周围分别贴上头孢他啶(CAZ)抗生素纸片、厄他培南(ETP)抗生素纸片、美罗培南(MER)抗生素纸片、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)抗生素纸片、头孢他啶/克拉维酸(CAZ/CLAV)抗生素纸片，且EDTA纸片与各抗生素纸片、两相邻抗生素纸片留有间距；(5)采用35℃孵育16～18h；(6)观察并分别记录EDTA纸片、各抗生素纸片抑菌环直径；(7)如果厄他培南(ETP)抗生素纸片和/或美罗培南(MER)抗生素纸片与头孢他啶/克拉维酸(CAZ/CLAV)抗生素纸片和/或哌拉西林/他唑巴坦(TZP)抗生素纸片协同，则判断为丝氨酸类(SCHBLs)；如果头孢他啶(CAZ)抗生素纸片和/或厄他培南(ETP)抗生素纸和/或美罗培南(MER)抗生素纸片与EDTA纸片协同，则判断为金属类(MCHBLs)。