[发明专利]一种结肠靶向重组毒素及制备方法和应用有效
| 申请号： | 201610394140.0 | 申请日： | 2016-06-06 |
| 公开（公告）号： | CN106084065B | 公开（公告）日： | 2019-08-30 |
| 发明（设计）人： | 胡盼;柳增善;任洪林;卢士英;李岩松;周玉;张嵩;柳溪林;李萌;常江 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C07K1/22;A61K38/16;A61P35/00 |
| 代理公司： | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人： | 魏征骥 |
| 地址： | 130000 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种结肠靶向重组毒素及制备方法和应用，属于利用基因工程制备结肠靶向重组毒素。一种结肠靶向重组毒素，其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示，以pET28a为表达载体，BL21(DE3)为表达宿主，构建了BL21(DE3)(pET28a‑rCCK96‑104PE38KDEL)重组工程菌株，带6聚组氨酸标签，便于纯化。利用Ni‑NTA金属螯合亲和层析柱，结合rTEV酶的特异性切割的方法，仅通过两步纯化，就获得了高活性、高纯度、无冗余序列的rCCK96‑104PE38KDEL重组蛋白，纯度在95％以上；在体外细胞实验中，纯化后的rCCK96‑104PE38KDEL重组免疫毒素能够特异性杀死高表达CCK2R的结肠癌细胞，抑制了癌细胞的增殖和扩散，对正常细胞和其它非CCK2R高表达肿瘤细胞没有杀伤作用，因此，rCCK96‑104PE38KDEL符合作为肿瘤靶向药物的条件，为治疗结肠癌提供了新的方向。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 结肠 靶向 重组 毒素 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种结肠癌靶向重组毒素，其特征在于：其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示，由反向翻译的胆囊收缩素9肽rCCK96‑104为导向单元与绿脓杆菌外毒素A衍生物PE38KDEL融合形成具有结肠癌靶向的重组毒素rCCK96‑104PE38KDEL。
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