[发明专利]一种1-脱氧野尻霉素的结晶方法

摘要

本发明公开了一种1‑脱氧野尻霉素的结晶方法，该方法包括：先将桑叶粉用酸性乙醇浸泡，并在超声波细胞破碎机中处理，过滤，收取滤液进行离心分离，制得粗提取液；通过阳离子交换树脂，进行洗脱；收集洗脱液后置于旋转蒸发仪中进行浓缩，再用正丁醇对浓缩物进行萃取；萃取后回收萃取液，将余物置于低温干燥箱中进行干燥；干燥后置于乙醇中，形成过饱和溶液后析出晶体，收集晶体干燥后即得成品。本发明提供的1‑脱氧野尻霉素的结晶方法可获得约0.2％的桑叶1‑DNJ提取率，显著高于传统的乙醇提取率0.00139％，及稀酸提取效率0.00147％，说明稀酸和乙醇在浸提桑叶1‑DNJ中发生了协同作用，产生了不可预见的效果。

主权项

1.一种1‑脱氧野尻霉素的结晶方法，其特征在于，该1‑脱氧野尻霉素的结晶方法包括以下步骤：先将桑叶粉用酸性乙醇浸泡，并在超声波细胞破碎机中处理，过滤，收取滤液进行离心分离，制得粗提取液；再将制备好的粗提取液通过阳离子交换树脂，进行洗脱；收集洗脱液后置于旋转蒸发仪中进行浓缩，再用正丁醇对浓缩物进行萃取；萃取后回收萃取液，将余物置于低温干燥箱中进行干燥；干燥后置于乙醇中，形成过饱和溶液后析出晶体，收集晶体干燥后即得成品；所述1‑脱氧野尻霉素的结晶方法具体为：提取：将桑叶粉碎过40目筛，称取300g于1000mL烧杯中，加入由HCL与乙醇混合得到pH为6.5的65％酸性乙醇800mL浸泡30min，放入功率为300W的超声波处理20min，过滤，收集滤液，残渣加入400mL 65％的酸性乙醇重复处理一次，过滤，弃去残渣，合并两次滤液，将合并两次后的滤液用旋转蒸发仪回收乙醇并浓缩至小体积，进行离心分离提取液，制得粗提取液；纯化：将制备后收集的1‑脱氧野尻霉素粗提取溶液上样到阳离子交换树脂的交换柱，并用蒸馏水洗脱，流速为1.0～2.0ml/min；待洗脱液由无色变为淡黄色时开始收集，直至洗脱液基本无色为止得到第一洗脱液，然后再用0.25mol/L的氨水洗脱第一洗脱液，洗脱速度为1一2ml/min，收集洗脱液，得到第二洗脱液；浓缩：将第二洗脱液置于旋转蒸发仪中，对1‑脱氧野尻霉素进行浓缩，在600mmHg条件下浓缩30min；萃取：用浓缩液相同体积的正丁醇萃取3次，得到1‑脱氧野尻霉素的正丁醇萃取液；干燥：用蒸馏法对1‑脱氧野尻霉素的正丁醇萃取液中的正丁醇进行回收，再将除去正丁醇后得到的物质置于300mmHg，10℃条件下的真空中干燥即得1‑脱氧野尻霉素成品；结晶：将一部分1‑脱氧野尻霉素成品加热溶于乙醇，形成饱和溶液，敞口放置于干燥环境，形成过饱和溶液，析出单晶晶体；剩余的另一部分蒸馏到0.8g/ml，加入96％乙醇搅拌结晶得到粉末状晶体；单晶晶体和粉末状晶体的检测方法：利用高效液相色谱─质谱联机检测法。