[发明专利]一种检测卡那霉素的方法

摘要

本发明提供了一种检测卡那霉素的方法，本发明采用双限制性内切酶切割位点及基于G‑四连体引发的颜色变化来检测卡那霉素，具体制备方法：将发夹和卡那霉素特异性结合；将均相反应混合液加入显色剂显示检测。本发明利用了G‑四联体的氧化性，实现了对目标物卡那霉素的高特异性检测；利用核酸工具酶，起到了信号放大的作用。

主权项

1.一种检测卡那霉素的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）目标物与发夹HAP的特异性结合；（2）对检测的特异性序列进行信号的放大；（3）对序列用紫外光谱仪进行比色检测；所述的步骤2）中，将1）中孵育好的混合溶液取出，加入2μL引物Primer，2μL dNTPs，2μL phi29DNA聚合酶与2μL Nt.Alwi内切酶，震荡30s，放入37℃的恒温箱中孵育1h；将孵育液与PP和AP杂交链一同混合，并继续放在37℃的恒温箱中孵育0.5h；所述的PP序列为：5~ GGG TTG GGC GGG ATG GGT TT AA T CAC ~3 （SEQ:ID:NO:1）；所述的AP序列为：5~ GGT TGA GGA AAC TAG CTT ATT AAA TTT AGT GAT TAAA CCCAT C ~3（SEQ:ID:NO:2）；所述的发夹HAP序列为：5~TGG GGG TTG AGG CTA AGC CGA TTGATCC T GGATCTTTT AAT CAC TAA ATTTAA TA AGC T AGT TT CCT CAA CC~3 （SEQ:ID:NO:3）；所述的引物Primer序列为： 5~ GGTT GAG GAA A ~3 （SEQ:ID:NO:4）。