[发明专利]用于在猫科动物中诊断和治疗肾功能障碍的组合物和方法

摘要

本发明涉及用于在猫科动物中诊断和治疗肾功能障碍的组合物和方法。本发明提供在猫科动物中诊断肾疾病的存在的方法，所述方法包括测量来自猫科动物的生物样品中选自以下的一种或多种生物标志物的表达水平：光亮蛋白聚糖；胶原蛋白α1 (III)链，变体12；核心蛋白聚糖；分泌型卷曲相关蛋白2；视黄醇结合蛋白5；MMP‑2；MMP‑7和MMP‑19，其中所述样品中的一种或多种生物标志物的表达相对于来自正常动物的样品中的表达的对照值的差异表明存在肾疾病；治疗如此诊断的猫科动物的方法；以及用于实施所述特定方法的组合物、试剂和试剂盒。

主权项

一种在猫科动物中诊断肾疾病的存在的方法，所述方法包括测量来自猫科动物的生物样品中光亮蛋白聚糖的表达水平，其中所述样品中的所述一种或多种生物标志物的表达相对于来自正常动物样品中表达的对照值的差异表明存在肾疾病，优选其中所述光亮蛋白聚糖的表达水平通过使用以下两种方法的任何一种方法测量光亮蛋白聚糖的基因表达来测定：(i)DNA微阵列，其包含一种或多种与对应于待测量的光亮蛋白聚糖的mRNA或cDNA互补的寡核苷酸，或(ii)采用对应于待测量的光亮蛋白聚糖的mRNA或cDNA的寡核苷酸引物的定量聚合酶链反应；更优选，其中测量光亮蛋白聚糖的基因表达的步骤包括(i)自组织样品分离RNA，(ii)逆转录所述RNA，以得到对应的cDNA，(iii)分离并裂解如此得到的cDNA，(iv)使cDNA片段与包含一种或多种与对应于所述一种或多种要测量的生物标志物的cDNA互补的寡核苷酸的DNA微阵列接触，和(v)检测cDNA片段与DNA微阵列中的所述一种或多种寡核苷酸之间的杂交；进一步优选，其中所述DNA微阵列中的寡核苷酸包括一种或多种能够与SEQ ID NO.9‑16中的一种或多种杂交的探针；更进一步优选其中所述DNA微阵列中的寡核苷酸包括一种或多种包含选自SEQ ID NO.1‑8中的一种或多种序列的探针；优选其中光亮蛋白聚糖的表达水平用表达的蛋白质的抗体进行检测；更优选其中光亮蛋白聚糖通过选自以下的免疫测定法检测：竞争性结合测定、非竞争性结合测定、放射免疫测定、酶联免疫吸附测定(ELISA)、三明治测定法、沉淀素反应、凝胶扩散免疫扩散测定、凝集反应测定、荧光免疫测定、化学发光免疫测定、免疫PCR免疫测定、A蛋白或G蛋白免疫测定和免疫电泳测定；优选其中光亮蛋白聚糖的表达水平通过使用定量质谱法测量样品中蛋白质的量进行检测；优选其中光亮蛋白聚糖的表达水平通过识别所表达的蛋白质的适体进行检测；优选其中所述生物样品为血液或肾脏组织的样品；优选其中所述猫科动物具有基本正常的肾功能，正如通过以下的一种或多种所测量的那样：正常的肾小球滤过率、肌酸酐清除率、尿蛋白水平、血清肌酸酐水平、尿肌酸酐水平、血尿素氮(BUN)水平、放射性同位素代谢标记、软组织成像，包括超声波扫描术、磁共振成像和/或计算机断层扫描；优选其中所述肾疾病为特征在于肾功能的异常丧失、肾衰竭、肾小球滤过率减少或肾小球性肾炎的疾病；优选其中所述肾疾病为肾小球性肾炎；优选其中肾疾病的存在通过光亮蛋白聚糖的表达相对于对照表达值的显著差异来指示，其中“显著差异”是增加到至少2倍。