[发明专利]用于降低酵母双杂交文库假阴性率的反转录方法在审

专利信息
申请号: 201610397749.3 申请日: 2016-06-07
公开(公告)号: CN106047862A 公开(公告)日: 2016-10-26
发明(设计)人: 肖云平;赵仕兰;李晖 申请(专利权)人: 上海欧易生物医学科技有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 上海唯源专利代理有限公司 31229 代理人: 曾耀先
地址: 201203 上海市浦东新区张江*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明涉及用于降低酵母双杂交文库假阴性率的反转录方法,包括增加两条5’反转录引物,反转录时使用3μg总RNA,每一种5’反转录引物使用1μg总RNA,反转录结束后,3份样本分别进行LD‑PCR扩增,扩增结束后将PCR产物进行后续检测,对T‑克隆序列进行测序时需要确定所增加的A必须存在,检测结果正确后,将三种PCR产物混合后进行后续建库实验。本发明改变了总RNA的反转录策略,降低了酵母双杂交文库的假阴性率。
搜索关键词: 用于 降低 酵母 双杂交 文库 阴性 转录 方法
【主权项】:
用于降低酵母双杂交文库假阴性率的反转录方法,其特征在于,总RNA反转录时,增加酵母双杂交文库一链5’反转录引物,在已有5’反转录引物的3’末端的3个G前面分别加上1个碱基A和2个碱基A,得到增加的两条5’反转录引物,并将三组反转录产物混合建库。
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