[发明专利]一种小麦根尖染色体制片的方法

摘要

本发明公开一种小麦根尖染色体制片的方法，其具体步骤为：在种子发芽后，取其幼根，经8‑羟基喹啉预处理后，用卡诺固定液固定、蒸馏水前低渗处理、纤维素酶和果胶酶酶解、蒸馏水后低渗处理，将处理后的根尖生长点用涂片法制片，最后在相差显微镜下镜检。本发明的染色体制片方法操作方便简单，染色体分散良好且背景较浅，易于计数，分裂相不易丢失。

主权项

一种小麦根尖染色体制片的方法，其特征在于，具体步骤如下：A）种子发根：将小麦种子放在垫有滤纸的培养皿中，加足量蒸馏水，于室温、遮光条件下培养；待种子露白后，于4℃、遮光培养20‑24小时；然后将培养皿置于22℃、遮光培养；B）预处理：当小麦种子根的长至0.5‑1.5cm时，剪取幼根放入浓度为2mM 8‑羟基喹啉溶液中，于20‑25℃、黑暗条件下，预处理2‑4h；C）固定：以蒸馏水清洗预处理后的幼根，室温条件下，卡诺氏固定液固定48h；D）酶解：用蒸馏水清洗将固定后的幼根，以刀片切取1.5‑2.5mm的根尖，放入酶解液中，37℃水浴酶解45min‑1h后，再以蒸馏水室温处理5min；所述酶解液配制方法为：将400mg纤维素酶和200mg果胶酶溶解于10ml浓度为0.01M柠檬酸缓冲液中；E）涂片：吸取一个根尖置于载玻片上，用吸水纸吸去根尖周围水分，加30µl 35%冰醋酸，用解剖针将根尖分生组织敲碎，再去掉大块组织残渣，置于40‑45℃的电热台面上，用解剖针将根尖组织涂匀，在35%冰醋酸挥发完之前，用1‑2ml卡诺氏固定液漂洗载玻片，于室温下凉干，即获得所述小麦根尖染色体制片。