[发明专利]一种尾巨桉流式检测的方法在审
| 申请号： | 201610402098.2 | 申请日： | 2016-06-07 |
| 公开（公告）号： | CN106092864A | 公开（公告）日： | 2016-11-09 |
| 发明（设计）人： | 韩超;徐建民 | 申请（专利权）人： | 中国林业科学研究院热带林业研究所 |
| 主分类号： | G01N15/14 | 分类号： | G01N15/14 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 裘晖 |
| 地址： | 510520 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于植物倍性检测领域，公开了一种尾巨桉流式检测的方法。该方法包括以下步骤：(1)取尾巨桉DH32‑29的嫩叶加入裂解液中，用刀片切嫩叶，裂解，得细胞裂解悬浮液；(2)将步骤(1)中所得的细胞裂解悬浮液过滤，将过滤后的液体离心，倒掉上清液，再次加入裂解液，使沉淀中的细胞核重新悬浮，然后再过滤，得滤液；(3)向步骤(2)中所得的滤液中加入RNase酶溶液进行酶解，得酶解液；(4)向步骤(3)中所得的酶解液中加入PI染液进行染色，得染色液；(5)将步骤(4)中所得的染色液在流式细胞仪上进行检测。该方法可实现野外取材后即时制备样品，获得的细胞核染色液2天(48小时)后做流式检测分析条件下，可确保检测效果的稳定性，解除了流式检测要采后即时进行检测的局限。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 尾巨桉流式 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种尾巨桉流式检测的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)裂解：取尾巨桉DH32‑29的嫩叶加入预冷的裂解液中，用刀片切嫩叶，使嫩叶的大小为0.0025～0.0225mm2，裂解，得细胞裂解悬浮液；(2)过滤：将步骤(1)中所得的细胞裂解悬浮液过滤，将过滤后的液体离心，倒掉上清液，加入预冷的裂解液，使沉淀中的细胞核重新悬浮，然后再过滤，得滤液；(3)酶解：向步骤(2)中所得的滤液中加入RNase酶溶液进行酶解，得酶解液；(4)染色：向步骤(3)中所得的酶解液中加入PI染液进行染色，得染色液；(5)流式检测：将步骤(4)中所得的染色液在流式细胞仪上进行检测。
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