[发明专利]硫代缩酮连接单元及其合成方法、用途

摘要

本发明公开一种硫代缩酮连接单元及其合成方法、用途；所述硫代缩酮连接单元的结构如式(Ⅰ)所示:其中，R＝‑OH或者‑COOH；R₁与R₂的满足如下条件中的一种：(1)R₁＝R₂＝甲基；或，(2)R₁＝苯基、对甲氧基苯基、2,4,6‑三甲氧基苯基、萘基或对甲氧基萘基，R₂＝H；或，(3)R₁、R₂共同构成环己基或环戊基。该单元与核苷酸及荧光素连接得到的荧光素标记核苷酸可用于DNA测序。与现有技术相比，本发明连接单元的可逆终止剂用于DNA测序时，其延伸效率接近100％，并且在模板为连续多个相同碱基时，一次只延伸一个可逆终止剂；其合成所需原料简单易得，合成过程均为常规化学反应，可用于大规模推广使用。

主权项

1.一种氧化敏感硫代缩酮连接单元的合成方法，其特征在于，所述氧化敏感硫代缩酮连接单元如式(Ⅰ)所示：其中，R＝‑OH；R1与R2的满足如下条件中的一种：(1)R1＝R2＝甲基；或，(2)R1＝苯基、对甲氧基苯基、2,4,6‑三甲氧基苯基、萘基或对甲氧基萘基，R2＝H；或，(3)R1、R2共同构成环己基或环戊基；所述合成方法包括如下：S21、丙酮、环戊酮、环己酮、苯甲醛、对甲氧基苯甲醛、2,4,6‑三甲氧基苯甲醛、萘醛或对甲氧基萘醛，与2‑巯基三氟乙酰胺以及含羟基保护基的2‑巯基乙醇反应，得到硫代缩酮化合物所述保护基为四氢呋喃、叔丁基二甲基硅；S22、所述硫代缩酮化合物在酸性溶液或者碱性溶液中去掉羟基保护基，得化合物所述碱性溶液包括四丁基氟化铵溶液；所述酸性溶液为稀盐酸或稀硫酸；S23、去掉化合物的氨基保护基，即得所述氧化敏感硫代缩酮连接单元