[发明专利]一组DNA分子及其重组质粒和重组大肠杆菌及其产紫云英苷的应用

摘要

一组DNA分子及其重组质粒和重组大肠杆菌及其产紫云英苷的应用，包括经优化的拟南芥糖基转移酶基因78D2，蔗糖磷酸化酶基因Basp，尿苷酰转移酶基因ugpA和蔗糖透性酶基因cscB，其核酸序列分别如SEQ ID NO:1，SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:6所示。该重组菌能高效表达全基因优化的糖基转移酶基因op78D2，该酶能高效、特异性的在山萘酚3位羟基进行糖基化；同时通过强化重组菌UDP‑glucose的合成途径，使重组菌能高效供应UDP‑glucose，解除重组菌合成紫云英苷的瓶颈。最终通过发酵条件的优化，实现了紫云英苷的高效合成。

主权项

1.含有重组质粒的大肠杆菌，其特征在于由以下方法制得：将重组质粒pGEX‑op78D2和重组质粒pACYCDuet‑cscB‑Basp‑UgpA共转化大肠杆菌BL21（DE3），获得重组大肠杆菌；所述重组质粒pGEX‑op78D2是SEQ ID NO:1所示的拟南芥糖基转移酶基因78D2以pGEX‑2T为载体构建而成；所述重组质粒pACYCDuet‑cscB‑Basp‑UgpA是SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:6所示的蔗糖磷酸化酶基因Basp，尿苷酰转移酶基因ugpA和蔗糖透性酶基因cscB以pACYCDuet‑1为载体构建而成。