[发明专利]具有提高免疫活性的黄蜀葵茎叶多糖乙酰化修饰产物及其制备方法

摘要

本发明公开了一种具有提高免疫活性的黄蜀葵茎叶多糖乙酰化修饰产物及其制备方法，黄蜀葵茎叶多糖乙酰化修饰产物中乙酰基含量为16.83％，多糖含量为82.50％，多糖由摩尔比为0.004:1.49:0.008:0.011的甘露糖、葡萄糖、半乳糖以及阿拉伯糖组成。本发明通过大量实验优选提取分离工艺，采用水提醇沉法得到粗多糖，再脱蛋白，然后采用DEAE‑52纤维素树脂进行纯化，制得纯度高的黄蜀葵茎叶多糖，再采用乙酸酐法修饰得到黄蜀葵茎叶多糖乙酰化修饰产物。本发明充分利用废弃的黄蜀葵茎叶资源，变废为宝，得到可提高免疫活性的黄蜀葵茎叶多糖乙酰化修饰产物，可实现中药资源的可持续化应用，具有很好的经济价值。

主权项

1.一种黄蜀葵茎叶多糖乙酰化修饰产物的溶液，其特征在于，黄蜀葵茎叶多糖乙酰化修饰产物中乙酰基含量为16.83％，多糖含量为82.50％，多糖由摩尔比为0.004:1.49:0.008:0.011的甘露糖、葡萄糖、半乳糖以及阿拉伯糖组成；黄蜀葵茎叶多糖乙酰化修饰产物的溶液的浓度为50～200μg/mL；蜀葵茎叶多糖乙酰化修饰产物的制备方法包括以下步骤：(1)取黄蜀葵茎叶乙醇提取后的药渣，加入药渣重量10～30倍体积的水，回流提取2～3次，每次1～2小时，过滤，合并滤液，减压浓缩；Sevag法除蛋白，离心，取上清液，加入无水乙醇，醇沉过夜，抽滤，取沉淀，依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，烘干，得黄蜀葵茎叶粗多糖；(2)黄蜀葵茎叶粗多糖的分级称取步骤(1)制备得到的黄蜀葵茎叶粗多糖，加蒸馏水溶解，加样于DEAE‑52层析柱中，用0.0、0.1、0.3、0.5mol/L NaCl溶液梯度洗脱，并采用苯酚‑硫酸法检测多糖含量，分别收集不同的洗脱峰，减压浓缩，透析，最后将透析液真空冷冻干燥，获得黄蜀葵茎叶多糖；(3)黄蜀葵茎叶多糖的乙酰化修饰取步骤(2)制备得到的黄蜀葵茎叶多糖，采用乙酸酐法进行修饰，具体步骤为：准确称取黄蜀葵茎叶多糖，溶于蒸馏水中，用氢氧化钠调pH为9.0，期间交替向溶液中加入乙酸酐和氢氧化钠以保持溶液pH为8.0～8.5，反应期间控制温度在25～30℃，然后再加入乙酸酐，反应结束后，用盐酸调整溶液的pH为7.0，将混合液置于透析袋中流水透析2～3天，取透析液减压浓缩，冻干，得黄蜀葵茎叶多糖乙酰化修饰产物。