[发明专利]结直肠癌组织溯源CTC分型鉴定试剂盒

摘要

本发明公开了一种结直肠癌组织溯源CTC分型鉴定试剂盒，其包括针对检测目标基因mRNA的捕获探针以及信号放大系统，所述目标基因包括有结直肠癌特异性基因、上皮细胞标志基因、和间质细胞标志基因，所述结直肠癌特异性基因选自CDX2、SATB2、CK20、CDH17；所述上皮细胞标志基因选自EpCAM、CDH1、CK17、CK19；所述间质细胞标志基因选自SNAI1、CTNNB1、FN1、TWIST1。本发明目标基因的选取，除了能实现单个目标基因的检测外，更与其它目标基因一起使用，从而能够最全面地检测出结直肠癌组织溯源CTCs，区分其他原发病灶来源的组织溯源CTCs，避免了假阴性和假阳性结果的出现，进一步提高检测的准确性。

主权项

一种结直肠癌组织溯源CTC分型鉴定试剂盒，其特征在于，包括针对检测目标基因mRNA的捕获探针以及信号放大系统，所述目标基因包括有结直肠癌特异性基因、上皮细胞标志基因、和间质细胞标志基因，所述结直肠癌特异性基因选自CDX2、SATB2、CK20、CDH17中至少两种；所述上皮细胞标志基因选自EpCAM、CDH1、CK17、CK19中的至少两种；所述间质细胞标志基因选自SNAI1、CTNNB1、FN1、TWIST1中至少两种，所述信号放大系统包括有末端修饰有荧光基团的扩增探针，或包括有扩增探针和末端修饰有荧光基团的标记探针，不同种类目标基因的荧光基团互不相同；其中，所述捕获探针用于连接目标基因mRNA与扩增探针，每条捕获探针从5’端到3’端的碱基组成依次为：可与待检测的目标基因mRNA结合的特异性序列P1、间隔臂序列、P2序列，所述P2序列为不存在发夹结构、探针内部和探针间不形成二聚体、不存在错配，与P1、P4和目标基因mRNA之间均不存在特异性结合的序列，针对同一类别目标基因mRNA的捕获探针的P2序列相同；每条扩增探针从5’端到3’端的碱基组成依次为：能与相应捕获探针的P2序列互补配对的P3序列、间隔臂序列、P4序列；所述P4序列为不存在发夹结构、探针内部和探针间不形成二聚体、不存在错配、与P1、P2、P3和总mRNA之间均不存在特异性结合的序列；每条标记探针具有与相应扩增探针P4序列互补配对的P5序列。