[发明专利]一种黎豆种皮黑色素的分离纯化方法

摘要

本发明提供一种黎豆种皮黑色素的分离纯化方法，分离纯化过程为将黎豆种皮通过水煮除杂后，按照1∶8‑12g/ml的料液比加入NaOH溶液超声浸提30‑50min，之后加入HC1溶液调pH<2，室温静置,离心收集得到胶状沉淀；纯化过程为将收集到的胶状沉淀悬浮于15‑25倍体积的HCl溶液，在沸水浴中水解2 ‑4h，冷却后离心收集固体颗粒；将收集的固体颗粒依次用乙醇、乙酸乙酯、丙酮洗涤，并在之后利用NaOH溶液和HCL溶液进行多次沉淀，得到黑色素颗粒。所述分离纯化方法操作简单，黎豆种皮黑色素的分离纯化量高并且纯度高，黑色素氧化程度低，分离纯化周期短，此外成本低廉，适合用于进行黎豆种皮黑色素的大规模分离纯化，提高了黎豆的经济价值，拓宽了黎豆的应用领域。

主权项

一种黎豆种皮黑色素的分离纯化方法，其特征在于，所述方法为：提取过程：将黎豆种皮通过水煮除杂后，按照1∶8‑12g/mL 的料液比加入NaOH溶液超声浸提30‑50min，之后加入0.5mol/L的HC1溶液调pH=1，室温静置,离心收集得到胶状沉淀；纯化过程：将收集到的胶状沉淀悬浮于15‑25倍体积1.5mol/L的HCl溶液，在沸水浴中水解2 ‑4h，冷却后离心收集固体颗粒；将收集的固体颗粒依次用其质量50倍体积的乙醇洗涤3次、乙酸乙酯洗涤2次、丙酮洗涤1次，每次洗涤过程中进行混合并震荡30min，然后4000 r/min离心分离10min，并在之后利用NaOH溶液和HCl 溶液进行多次沉淀，得到黑色素颗粒；将上述的黑色素颗粒冷冻后在室温下解冻，用蒸馏水洗涤沉淀，至离心上清液Cl‑定性检测为阴性后，在室温下真空干燥至恒重。