[发明专利]一种噬菌体的大规模生产方法

摘要

本发明提供了一种噬菌体的大规模生产方法，在生产过程中，定时检测噬菌体培养液的OD值，当噬菌体的宿主菌液培养到增殖活性最强的对数生长期时，静置后进行扩大培养，离心裂解后滤过除菌得到大规模的噬菌体液。本发明所述的噬菌体的大规模生产方法，方法合理，应用方便，生产效率高，生产的噬菌体效价高，热稳定性好。

主权项

一种噬菌体的大规模生产方法，其特征在于：包括以下步骤：1）噬菌体母液加入母液体积200‑1000倍的噬菌体培养基中，于32‑40℃条件下振荡培养0.5‑4h，每间隔20‑30min取样检测OD值，培养至OD_550‑600值为0.2‑0.5；2）静置噬菌体液0.5‑2h；3）将步骤2）中的噬菌体液转接到体积20‑200倍的新鲜噬菌体培养基中，于32‑40℃条件下振荡培养8‑16h，得到大规模噬菌体液；4）所述大规模噬菌体液于8000‑12000g离心10‑20min；5）上清液经过0.22‑0.45μm滤膜，得大规模噬菌体悬液；上述的噬菌体培养基以重量组分计，包括以下组分：牛肉膏 4‑8份、蛋白胨 5‑12份、酵母膏粉 0.8‑1.2份、葡萄糖 0.6‑1份、乳糖 1‑1.6份、柠檬酸钠 0.2‑0.5份、柠檬酸铁 0.1‑0.3份、硫代硫酸钠 0.2‑0.8份、氯化钙 0.6‑1.2份、氯化镁 0.05‑0.2份、硫酸钠 0.6‑0.8份、硫酸锰 0.1‑0.3份、甘露醇 0.8‑1.2份、磷酸二氢钾0.03‑0.3份、磷酸氢二钠 0.05‑0.2份、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐 0.6‑2份和水 100份，并且调节pH到7‑7.5。