[发明专利]一种检测蚕砂制品抗细菌性能的方法

摘要

本发明公开了一种检测蚕砂制品抗细菌性能的方法；步骤如下：1、在营养琼脂培养基斜面划线接种，作为斜面保藏菌；2、在琼脂斜面中挑取1个典型的细菌菌落，接种于营养肉汤中得到细菌菌悬液；3、吸取细菌菌悬液，移入装有PBS的试管中，充分混匀、稀释后作为接种菌悬液；4、制作加样袋；5、将加样袋加入无菌水预润湿作为空白对照品，加样袋中分别加入抗菌蚕砂制品及非抗菌蚕砂制品，加入无菌水预润湿作为待测样品及对照样品；6、将待测样品、对照样品和空白对照品分别置于涂布接种菌悬液的琼脂平板表面，取少量接种菌悬液滴加于三个样品上；7、在培养期间，记录并获得蚕砂制品的抗菌性能。通过上述方式，本发明操作简单、速度快、使用成本低。

主权项

一种检测蚕砂制品抗细菌性能的方法，其特征在于：具体步骤如下：步骤1：细菌冻干菌菌粉中加入溶菌肉汤，37℃±1℃恒温振荡培养18小时，然后用接种针于营养琼脂培养基斜面划线，37℃±1℃，培养24小时，此斜面可在2~8℃下保存1个月，作为斜面保藏菌；步骤2：在步骤1得到的琼脂斜面中挑取1个典型的细菌菌落，接种于20mL营养肉汤中，37℃±1℃，振荡培养18~20小时，得到细菌菌悬液；然后利用分光光度法测定细菌浓度，此菌悬液活菌数应达到1×10⁹~5×10⁹CFU/mL；步骤3：吸取步骤2中的细菌菌悬液1.8mL~2.5mL，移入装有9mL PBS的试管中，充分混匀，依次进行10倍梯度稀释，稀释至活菌数为200CFU~250CFU的范围，作为接种菌悬液；步骤4：剪取真丝圆片，两片对称缝制真丝布袋作为加样袋，真丝边缘不超过0.3mm，121℃湿热灭菌15min；步骤5：在步骤4中的加样袋中分别加入抗菌蚕砂制品及非抗菌蚕砂制品，加入含有0.05%非离子润湿剂的无菌水预润湿，使蚕砂的湿度平衡至90%以上，作为待测样品及对照样品；步骤6：将步骤4中的加样袋加入含有0.05%非离子润湿剂的无菌水预润湿，作为抗菌性能检测的空白对照品；步骤7：取步骤3制备的接种菌悬液均匀涂布于琼脂平板培养基中，将步骤5中的待测样品、对照样品及步骤6中的空白对照品分别置于琼脂平板表面，取少量步骤3制备的接种菌悬液分别滴加于每个待测样品、对照样品及空白对照品上，37℃±1℃培养18~24小时，每个样品至少3个平行试验；步骤8：在培养期间，记录各样品表面细菌生长情况，将待测样品、对照样品和空白对照品培养后的各平行试验的实际活菌数值的平均值分别记为数值A、B和C。按下式计算抗菌蚕砂制品的抗菌率：抗菌率=（B‑A）/B×100%，获得蚕砂制品的抗菌性能，以百分率计。