[发明专利]一种卷烟烟气冷凝物生物安全性的检测方法

摘要

一种卷烟烟气冷凝物生物安全性的检测方法，为解决烟气检测方法不完善的问题，本发明采用彗星实验，选用中华仓鼠尾部细胞进行彗星实验，通过测定其尾部DNA百分含量(％tail DNA)评价细胞DNA损伤程度，用CASP彗星图像分析软件进行分析，本发明的有益效果在于：为深入研究吸烟烟气中的致突变物质对人体健康的危害作用，为吸烟与健康研究提供更全面的科学依据。

主权项

一种卷烟烟气冷凝物生物安全性的检测方法,其特征在于，所述的方法包括如下步骤：(1)收集卷烟烟气冷凝物：用滤片收集卷烟烟气冷凝物；(2)单细胞悬液制备：准备密度为(1‑5)×10⁶单细胞悬液，用苔盼蓝染色记数细胞活性，细胞活性>80％；(3)凝胶制片：第一层铺上正常熔点琼脂糖，待其固化后在第一层上铺上单细胞悬液与低熔点琼脂糖，两者的比例为2:15；第二层固化后再于第二层上铺上低熔点琼脂糖；(4)细胞裂解：待三层胶凝固后去掉盖玻片，将载玻片至于细胞裂解液中；(5)电泳：裂解完毕后，取出载玻片后平行置于电泳槽中，载玻片之间不留空隙，放入电泳液，电泳18‑20min；(6)中和染色：电泳后先用中和缓冲液浸泡，再用甲醇固定，最后用溴化乙锭染色；(7)读片：荧光显微镜下读片，对细胞进行分析，计算尾部DNA百分比以判断细胞的损伤程度。