[发明专利]一种雌雄同体紫菜双单倍体群体组建的方法

摘要

本发明公开了一种雌雄同体紫菜的双单倍体群体组建的方法；取颜色差异明显的雌雄同体紫菜叶状体(配子体)作为杂交亲本；将已形成精子囊的双亲叶状体混合培养，收集果孢子；选取具萌发管的果孢子单独培养成丝状体(孢子体)；诱导并获取该丝状体的壳孢子，培养至肉眼可见的F₁叶状体，如90％以上的叶状体是含有双亲颜色的嵌合体，则用于组建双单倍体群体；分离四色块嵌合体上的每个色块，获取每个色块的单孢子或单离体细胞培养至肉眼可见的叶状体，通过该叶状体单棵培养和自体受精获得每棵四色块嵌合体上每个色块的纯系丝状体，组成双单倍体群体。本发明解决了雌雄同体紫菜双单倍体群体的组建问题，为其遗传连锁图谱的构建奠定基础。

主权项

一种雌雄同体紫菜双单倍体群体组建的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：S1、选取叶状体颜色差异明显的雌雄同体紫菜叶状体作为杂交亲本；S2、选取已形成精子囊的双亲叶状体混合培养，至双亲叶状体上开始有果孢子囊的形成时，将双亲叶状体分开单独培养，直至各自叶状体上的果孢子囊发育成熟，分别收集果孢子；S3、当果孢子形成萌发管时，取单个萌发的果孢子单独培养，使其萌发成一个单克隆的丝状体藻落；S4、培养所述单克隆的丝状体藻落经诱导后放散的壳孢子，至肉眼可见的F₁叶状体，显微镜下观察F₁叶状体的颜色及色块数量，如90％以上的F₁叶状体为含有双亲颜色的嵌合叶状体且色块数为2块、3块或4块，则该单克隆的丝状体藻落是由双亲杂交而成的杂合丝状体，其F₁代中有四个色块的嵌合叶状体用于构建双单倍体群体；S5、从含有四个色块的嵌合叶状体上分离单个色块，取该色块经诱导后放散的单孢子或单离体细胞，培养至肉眼可见的叶状体，取单棵培养，最终通过该单棵叶状体自体受精获得每棵四色块嵌合叶状体上每个色块的纯系丝状体，从而组建成双单倍体群体；步骤S3中，当果孢子形成萌发管且萌发管的长度达到果孢子直径的3‑5倍时，取单个萌发的果孢子单独培养；所述雌雄同体紫菜为条斑紫菜。