[发明专利]一种联合中药激活扩增的间充质干细胞及制备方法和应用有效
申请号: | 201610430959.8 | 申请日: | 2016-06-15 |
公开(公告)号: | CN105985930B | 公开(公告)日: | 2019-12-13 |
发明(设计)人: | 王仲 | 申请(专利权)人: | 辛普森国际生命科技(天津)有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61K35/28;A61P1/16 |
代理公司: | 51229 成都正华专利代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 李蕊 |
地址: | 300467 天津市滨海新区天津生*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明提供一种联合中药激活扩增的间充质干细胞,其制备方法包括以下步骤:(1)预处理:使用胰酶和Ⅳ型胶原酶消化组织块,分离原代间充质干细胞;(2)培养:将步骤(1)所得细胞加入成分为含50‑80mg/mL的珍珠草提取物、50‑80mg/mL的五倍子提取物、1.5‑3mmol/mL的L‑谷氨酰胺、1.5‑3ng/mL bFGF的低糖DMEM培养基中,于37℃、5%CO | ||
搜索关键词: | 一种 联合 中药 激活 扩增 间充质 干细胞 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种联合中药激活扩增的间充质干细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:/n(1)预处理:在无菌条件下,将含有间充质干细胞的组织用PBS缓冲液清洗2-3次后,切碎,获得组织碎块,然后将组织碎块按1:3的体积比与含有胰酶和Ⅳ型胶原酶的低糖DMEM混合液混合,在37℃下消化1-2h,再加入终浓度为25ug/mL的透明质酸酶消化5-10min,100-200r/min下离心5-10min,弃上清,用含10%FBS的低糖DMEM培养基清洗沉淀1次,于100-200r/min下离心5-10min,去除上清液得沉淀;/n(2)培养:将步骤(1)所得沉淀加入培养基中,于37℃、5%CO
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