[发明专利]一种黄缘盒龟唾液及口腔上皮中提取DNA的方法有效
申请号: | 201610431671.2 | 申请日: | 2016-06-17 |
公开(公告)号: | CN105907750B | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
发明(设计)人: | 寿建昕 | 申请(专利权)人: | 绍兴文理学院元培学院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 杭州君度专利代理事务所(特殊普通合伙) 33240 | 代理人: | 杨天娇 |
地址: | 312000 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及一种黄缘盒龟唾液及口腔上皮中提取DNA的方法,属于DNA分离纯化技术领域。用口拭子插入黄缘盒龟的口腔,在口腔上下部来回擦拭后放入装有PBS溶液中,震荡;加入裂解液,混匀后水浴;离心,沉淀加碘化钾溶液,漩涡,再分别加入NaCl和酚/氯仿溶液,震荡,离心;取上清液,加入与上清同样体积的异丙醇,涡旋震荡离心;弃上清液,在沉淀中加入70%乙醇洗涤,离心;沉淀室温晾干,当沉淀块变透明时,加入TE缓冲液溶解。将发明应用于黄缘盒龟DNA提取,具有操作便捷、黄缘盒龟损伤小等优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 黄缘盒龟 唾液 口腔 上皮 提取 dna 方法 | ||
【主权项】:
一种黄缘盒龟唾液及口腔上皮中提取DNA的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)用口拭子插入黄缘盒龟的口腔,在口腔上下部来回擦拭后放入装有500 μL的0.01 mol /LPBS 溶液中,用涡旋振荡器震荡2min,取出口拭子;(2)加入1mL裂解液,混匀后水浴;(3)离心,沉淀加碘化钾溶液,漩涡,再分别加入NaCl和酚/氯仿溶液,震荡,离心;(4)取上清液,加入与上清同样体积的异丙醇,涡旋震荡离心;(5)弃上清液,在沉淀中加入70%乙醇洗涤2次,离心;(6)沉淀室温晾干,当沉淀块变透明时,加入TE 缓冲液溶解。
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