[发明专利]基因敲除方法在审
| 申请号： | 201610439385.0 | 申请日： | 2016-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN107513538A | 公开（公告）日： | 2017-12-26 |
| 发明（设计）人： | 魏文胜;周悦欣;张鸿敏 | 申请（专利权）人： | 北京大学 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90 |
| 代理公司： | 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙)11535 | 代理人： | 刘元霞,牛艳玲 |
| 地址： | 100871 北京市海淀区颐和*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及供体构建体，以及基因敲除方法及其系统和试剂盒。本发明的基因敲除方法通过非同源末端连接将供体构建体中包含的标记物基因插入到细胞基因组中的双链断裂位置上，通过表达的标记物富集基因被敲除的细胞，提高了通过序列特异性核酸酶产生基因敲除的效率。 | ||
| 搜索关键词： | 基因 方法 | ||
【主权项】：
提供供体构建体，所述供体构建体是线性供体DNA或可在细胞中被切割产生线性供体DNA，所述线性供体DNA由中间向两端依次包含：表达盒；位于表达盒5'端的由反向终止密码子组成的短的序列延伸和位于表达盒3'端的由正向终止密码子组成的短的序列延伸；位于5'端和/或3'端的靶序列，所述靶序列含有可被所述序列特异性核酸酶切割的靶位点；位于两端的保护序列；其中所述表达盒包含由启动子驱动的标记物基因；优选，所述序列特异性核酸酶是锌指核酸酶(ZFN)、转录激活物样效应子核酸酶(TALEN)、Cas9核酸酶、或NgAgo核酸酶；优选，所述线性供体DNA仅在5'端或3'端具有靶序列，或所述线性供体DNA在两端分别具有靶序列；进一步优选，所述线性供体DNA中两端的靶序列不同；更进一步优选，所述线性供体DNA中两端的不同靶序列来自于相同的基因，或所述线性供体DNA中两端的不同靶序列来自于不同的基因；优选，所述标记物基因是抗生素抗性基因或荧光蛋白基因。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于北京大学，未经北京大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201610439385.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
