[发明专利]一种化学-酶法制备去氢表雄酮的方法

摘要

本发明公开了一种化学‑酶法制备去氢表雄酮的方法，以4‑雄烯二酮为初始底物，依次进行化学法和生物法两步制得去氢表雄酮，在制备过程中，对两步反应过程进行了优化，在化学法制备5‑雄烯二酮的过程中，将反应液加入到了混合有抗坏血酸钠和醋酸的水溶液中，使反应条件更为温和，同时在第二步生物法制备去氢表雄酮过程中，采用了酮还原酶作为催化剂，使得制备所得的产物的收率和纯度更高，同时在整个反应过程中辅酶和叔丁醇钾等原料的用量更低，具有较高的实用价值。

主权项

一种化学‑酶法制备去氢表雄酮的方法，其特征在于，包括如下步骤：1）以4‑雄烯二酮为底物，在温度为20~40℃、氮气保护下，以叔丁醇为溶剂，在叔丁醇钾的作用下反应1~12h，而后将该反应液加入到混合有抗坏血酸钠、醋酸的水溶液中，HPLC检测反应进程，当转化率达90~99%时，反应结束，得到5‑雄烯二酮，其中，叔丁醇钾与4‑雄烯二酮的投料质量比为2~0.5:1；2）将步骤1）得到的5‑雄烯二酮与溶剂、水相缓冲溶液构成反应体系，加入生物催化剂、六水氯化镁、辅酶和辅酶再生系统，在25~40℃的温度条件下进行反应，控制整个反应过程的pH在6.0~7.5，HPLC检测反应进程，当转化率达90‑99%时，反应结束，得到产物去氢表雄酮，其中，所述的溶剂为2‑甲基四氢呋喃，所述的生物催化剂为酮还原酶，所述的辅酶再生系统为葡萄糖和葡萄糖脱氢酶，所述的葡萄糖：生物催化剂:葡萄糖脱氢酶：5‑雄烯二酮的投料质量比为：0.8~1.2:0.008~0.016:0.004~0.008:1。